Silver-ion-mediated Mg
本文利用银离子可介导Mg2+依赖DNAzyme(Mgzyme)活性的特性,首次开发了一种用于半胱氨酸(Cys)放大检测的开启型荧光生物传感器。由于Mgzyme可与Ag+相互作用形成胞嘧啶-Ag+-胞嘧啶(C-Ag+-C)碱基对,其催化核心构象发生改变,催化活性被抑制,Mgzyme-Ag+复合物不能启动切割反应,因此传感器背景荧光很低...
本文利用银离子可介导Mg2+依赖DNAzyme(Mgzyme)活性的特性,首次开发了一种用于半胱氨酸(Cys)放大检测的开启型荧光生物传感器。由于Mgzyme可与Ag+相互作用形成胞嘧啶-Ag+-胞嘧啶(C-Ag+-C)碱基对,其催化核心构象发生改变,催化活性被抑制,Mgzyme-Ag+复合物不能启动切割反应,因此传感器背景荧光很低...
本文报道了一种基于目标触发级联信号放大策略的高灵敏荧光生物传感器,用于痕量三价砷(As3+)检测。As3+与特异性适配体-DNA2复合物结合后,导致复合物解旋并释放DNA2。释放的DNA2与固定在磁珠(MB)上的发夹探针(HP)的3′突出端互补,使DNA1-HP形成3′平末端,从而触发外切酶III(Exo III)循环消化过程,反复...
钠是生物体系中最常见的金属离子之一,但基于DNA的钠探针直到近期才被报道。NaA43是一种仅由Na+激活的Na+特异性RNA切割DNAzyme。本研究以六氨合钴(III)(Co(NH3)63+)作为预期金属辅因子进行体外筛选,却获得NaA43的突变体NaH1,二者仅相差两个核苷酸。NaA43的最适pH为7.0,而NaH1的最适pH为...
本文报道了一种用于检测 Argonaute 2(Ago2)活性的新型 DNAzyme 生物传感器。该传感器以目标 Ago2 启动的滚环扩增(RCA)与 8-17 DNAzyme 介导的双重信号放大策略为基础。底物 RNA(sRNA)5'端含引物序列、3'端含阻断序列;Ago2 与引导 RNA(gRNA)形成活性 RISC 后切割 s...
三聚氰胺是富氮化合物,曾被用作食品和牛奶添加剂以虚假提高蛋白质含量,但具有毒性,高浓度可致肾和泌尿系统问题甚至死亡,因此食品与牛奶中三聚氰胺检测很重要。已有多种方法可在生乳中检测三聚氰胺,但通常需样品前处理。本研究旨在开发一种适配体-DNAzyme偶联生物传感器,用于生乳中三聚氰胺的无标记、无样品前处理检测。通过微阵列分析筛选候选适...
本研究通过化学交联法构建了氧化石墨烯(GO)-双链DNA(dsDNA)-CdTe量子点(QDs)复合物,开发了一种“开启型”荧光铜离子生物传感器。利用荧光光谱和透射电镜对复合物的光学与结构性质进行了表征,结果表明CdTe QDs的荧光猝灭源于二维GO的表面猝灭和荧光共振能量转移(FRET)过程。当体系中不存在Cu2+时,GO与dsD...
作者设计了一种 DNAzyme,其中氧化石墨烯(GO)与单链 DNA 茎环区相互作用。DNAzyme 链与底物链杂交并结合到 GO 表面,GO 作为强猝灭剂抑制背景信号。Pb(II) 存在时破坏 GO-DNAzyme 复合体并催化 DNAzyme 内部切割;随后加入硫黄素 T(ThT)作为 G-四链体诱导剂,释放的富含 G 片段折叠...
本研究构建了一种无标记 DNAzyme 放大荧光生物传感器,用于水相体系中 Pb2+ 的高选择性、高灵敏检测。该传感器由 GR-5 DNAzyme 酶链与含 RNA 位点 rA 的底物链杂交形成复合物。当存在 Pb2+ 时,DNAzyme 被激活并催化切割底物链的 rA 位点,释放寡核苷酸片段;游离片段随后与固定在羧基磁珠表面的互补...
近年来,少数具有 Na+ 特异性的 RNA 切割 DNAzyme 被报道,并从 NaA43 和 Ce13d DNAzyme 中鉴定出 Na+ 适配体;这些 DNAzyme 及其嵌入适配体已被用于 Na+ 检测。本研究利用荧光共振能量转移(FRET)考察 Ce13d DNAzyme 的 Na+ 依赖性折叠。当 FRET 供体和受体分别...
本文报道了一种基于拥挤 TTE DNA 模板制备增强荧光铜纳米粒子(TTE DNA–Cu NPs)并用于目标 DNA 触发的双循环放大荧光生物传感器的策略。DNA 模板金属化可制备荧光纳米探针,其中 polyT 单链 DNA 模板 Cu NPs 具有较强荧光,但荧光增强仍有限。作者设计两端可互补形成双螺旋、中间含 polyT 区的 ...
微小RNA(microRNA)参与多种生物过程,并被视为疾病生物标志物,因此发展简单、快速、灵敏且选择性好的 microRNA 检测方法对疾病早期诊断和诊疗具有重要意义。本文基于 DNA 聚合酶诱导的链置换扩增反应、Mg2+ 依赖的 DNAzyme 催化反应和磁分离,建立了一种用于 microRNA-21(miRNA-21)检测的灵...
本文报道了一种基于 ZnFe2O4@Au-Ag 双功能纳米复合材料和 DNA/CeO2 复合物的金属增强比率荧光/肉眼双模态生物传感器,用于 Pb2+ 检测。该纳米复合探针由磁性 ZnFe2O4 核和 Au-Ag 空心纳米立方壳组成,经生物偶联后既可通过磁分离实现探针循环使用,又能通过金属增强荧光效应提供“热点”以增强 Pb2+ 检...
本文基于目标诱导的免疫邻近结合和金属离子依赖的DNAzyme循环信号放大,开发了一种均相、高灵敏的荧光检测方法,用于蛋白肿瘤标志物检测,并以α-甲胎蛋白(AFP)为模型靶标。两条含短互补区的DNA分别偶联到识别AFP不同表位的抗体上,构成识别探针。由于互补区熔解温度(Tm)较低,无AFP时两条DNA难以杂交;当抗体-DNA探针与AF...
许多理性设计的DNA纳米结构采用机械互锁拓扑连接各DNA组分,其物理连接依赖于强连接双链的形成,但该结构元素也对组分环的功能产生显著拓扑约束。本文提出并证实:具有强连接双链的DNA结环会阻止其组分环作为滚环扩增(RCA)模板。进一步地,作者利用含RNA的DNA[2]结环,在刺激响应型RNA切割DNAzyme作用下使一个组分环线性化,...
本文报道了一种基于 Cu2+ 依赖型 DNAzyme 的新型信号放大策略,用于检测 Cu2+ 离子。该方法将杂交链反应(HCR)与荧光共振能量转移(FRET)技术相结合。在 Cu2+ 存在下,固定在磁珠上的 Cu2+ 依赖型 DNAzyme 的底物链被特异性切割并释放。释放的链作为起始链,触发分别标记羧基荧光素(FAM)供体和四甲基...
DNA酶(DNAzyme)因其在金属离子辅助下切割底物的独特功能,已被广泛研究作为生物传感器,但基于金纳米颗粒的视觉检测报道较少。本文通过滚环扩增(RCA)合成了约1 μm的DNAzyme微颗粒(DzMP),无需其他材料即可用于Pb2+检测。随后,将底物链标记两种不同荧光基团(6-羧基荧光素6-FAM和Cy5),以可视化DzMP并监...
开发高灵敏、高选择性检测超低浓度肿瘤标志物的方法对癌症疗效评估和早期临床诊断具有重要意义。本文利用TiS2纳米片作为荧光偏振(FP)增强剂,并采用Zn2+依赖的自水解脱氧核酶(DNAzyme)作为催化剂,建立了两种FP放大检测策略,用于生物分子检测。一种策略基于小分子连接DNA的末端保护:生物分子与DNA-小分子嵌合体中的小分子结合...
DNAzyme 是具有催化活性的单链 DNA 分子,可通过体外筛选从合成随机序列 DNA 文库中分离获得。RNA 切割 DNAzyme 是研究最深入的 DNAzyme 类别之一,已广泛用于多种分析物的生物传感器和生物检测。本文聚焦于将 RNA 切割 DNAzyme 开发为细菌传感器,这类探针被设计为同时完成三项关联功能:识别细菌生物...
银是常见重金属,其检测具有重要分析意义。DNAzyme 是一类 DNA 催化剂,通常依赖二价或三价金属离子实现催化。本文报道了一种经六轮体外选择获得的银特异性 RNA 切割 DNAzyme,命名为 Ag10c。在 pH 7.5、200 mM NaNO3 条件下,10 μM Ag+ 时 Ag10c 的催化速率为 0.41 min−1;...
铜离子在生物、环境和工业领域极为重要,开发高灵敏、高选择性 Cu2+ 生物传感器是分析化学的关键课题。基于 DNAzyme 的传感器因灵敏度高、稳定性好、可编程性强而备受关注。过去十年,已有少数利用 DNA 切割或 DNA 连接活性 DNAzyme 的 Cu2+ 传感器,但它们需要不稳定的抗坏血酸或咪唑活化;迄今尚无 Cu2+ 专一...