Current protocols in neuroscience
2020
Liput DJ, Nguyen TA, Augustin SM, Lee JO 等 5 人
荧光寿命成像(FLIM)与福斯特共振能量转移(FRET)是神经科学家可用于在离体和活体条件下利用光探测复杂生物系统结构与功能的高级光学工具。在神经生物学中,它们主要用于研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质复合物的构象变化,以及监测基于FRET的遗传编码生物传感器,尤其适合对光遗传学触发的神经元变化进行光学监测。由于理解FLIM与FRE...
ACS chemical neuroscience
2020
Monakhov MV, Matlashov ME, Colavita M, Song C 等 8 人
作者开发了一类基于细菌光敏色素衍生近红外荧光蛋白的遗传编码电压指示剂。这些新指示剂采用跨膜电压传感域,经 640 nm 光激发,并在 670 nm 检测发射,从而可在近红外组织透明窗口成像。其光谱特性允许与蓝绿光光遗传执行器同时激活,也可与绿色钙指示剂配对实现电压-钙同步成像。经迭代优化得到名为 nirButterfly 的荧光探针...
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
2020
Sato S, Yamashita T, Matsuda M
视网膜中光诱导的突触外多巴胺释放可降低视杆细胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平,并介导光依赖性脱敏,但视杆细胞 cAMP 动态的精细时间过程因技术困难而难以解析。本研究利用表达 FRET 型蛋白激酶 A(PKA)活性生物传感器 AKAR3EV 的 PKAchu 小鼠,通过双光子活体成像观察离体视网膜中 PKA 的时空调控。除已知的开光诱...
Journal of the American Society of Nephrology : JASN
2020
Yamamoto S, Yamamoto M, Nakamura J, Mii A 等 13 人
背景:肾小管细胞 ATP 耗竭在肾脏疾病发病机制中起核心作用,但体内 ATP 时空分布与动态难以可视化。方法:作者利用全身表达 FRET 型 ATP 生物传感器 GO-ATeam(由 ATP 合酶 ε 亚基与两种荧光蛋白组成)的 GO-ATeam2 小鼠,通过双光子显微镜在单细胞分辨率下观察热缺血再灌注和冷缺血再灌注过程中的 ATP...
Frontiers in chemistry
2020
Ghosh S, Chen Y, George A, Dutta M 等 5 人
本研究合成了一种用于检测钙离子的简单光学适配体传感器。该传感器采用半导体量子点(QD)与金纳米颗粒(AuNP)作为供体-猝灭体对,基于荧光共振能量转移(FRET)原理工作。钙离子结合后,DNA适配体发生构象变化,改变分别连接在适配体5′端和3′端的QD与AuNP之间的距离,从而导致QD发射被猝灭。在35 nM钙离子浓度下,传感器实现...
ACS applied materials & interfaces
2020
Chen M, Grazon C, Sensharma P, Nguyen TT 等 14 人
将生物传感器固定于功能材料中是实现器件开发与可穿戴技术转化的关键。本文报道并评估了一种固定化的量子点–转录因子–核酸复合物,用于孕酮检测,作为器件集成的初步步骤。该传感器由多组氨酸标签转录因子、量子点和荧光标记同源DNA组成,并嵌入水凝胶固定基质中。水凝胶光学透明、柔软且柔韧,可截留量子点–转录因子–DNA组装体,同时允许被测物孕酮...
Nature communications
2020
Bennett NK, Nguyen MK, Darch MA, Nakaoka HJ 等 13 人
能量代谢紊乱是细胞功能障碍和多种疾病的重要驱动因素,但增加或维持细胞内三磷酸腺苷(ATP)水平的方法仍缺乏。为绘制调控细胞ATP的基因与通路全景图谱——ATPome,作者将全基因组CRISPR干扰/激活筛选与ATP生物传感器相结合,在呼吸、糖酵解和基础三种代谢条件下系统鉴定ATP调控基因。结果显示,ATP水平可通过促进能量生成或抑制...
Analytical sciences : the international journal of the Japan Society for Analytical Chemistry
2020
Zeng N, Guo Y, Xiang J
监测 KRAS 点突变水平(KRAS 点突变 DNA 浓度占总 DNA 浓度的比例)随临床治疗进程的变化,可指导并显著改善癌症患者的个体化治疗与疗效评估。本研究基于荧光共振能量转移(FRET)荧光猝灭和脱嘧啶位点(AP 位点)诱导的鸟嘌呤/蝶啶特异性结合,构建了一种蝶啶-FAM-TAMRA 三色荧光传感系统,用于一步评估 KRAS ...
ACS sensors
2020
Ji C, Zhou Y, Leblanc RM, Peng Z
疾病早期诊断对提高治愈率、降低治疗成本具有重要意义,因此发展快速、灵敏、可靠的生物传感技术至关重要。多种纳米材料已被用于提升生物传感器性能,其中碳点(CDs)因优异的光学、电化学性质、低毒性和生物相容性而备受关注。本综述系统总结了碳点基生物传感器的最新进展。首先,按传感策略对生物传感器进行分类,并详细阐述碳点在其中的作用;其次,重点...
Experimental neurology
2020
Iffland PH, Barnes AE, Baybis M, Crino PB
TSC1或TSC2突变导致结节性硬化症(TSC),引起mTOR过度激活,表现为S6和4E-BP1过度磷酸化。氨基酸水平调节非神经细胞mTOR依赖的S6和4E-BP1磷酸化,但在神经元中研究不足。本研究在Tsc2和Depdc5 CRISPR编辑的Neuro2a(N2a)细胞及分化神经元中,分析氨基酸水平对mTOR信号和S6、4E-BP...
European journal of pharmacology
2020
Krarup S, Mertz C, Jakobsen E, Lindholm SEH 等 6 人
抗癫痫钠通道阻滞剂卡马西平(carbamazepine, CBZ)长期以来被认为可减弱cAMP信号,而cAMP信号参与癫痫发生和发作。然而,上市结构衍生物奥卡西平(oxcarbazepine, OXC)、艾司奥卡西平醋酸酯(eslicarbazepine acetate, ESL)及其主要代谢物利卡西平(licarbazepine,...
International journal of molecular sciences
2020
Seitz K, Krysan PJ
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是植物多种生物学过程的关键调控因子。为深入理解这些激酶的作用机制,需要在不同生物学背景下对 MAPK 激活动力学进行高分辨率测量。基于荧光的基因编码生物传感器可在活组织中实时读出激酶激活的时空动态,是研究 MAPK 功能的重要工具。尽管荧光生物传感器已广泛用于动物细胞 MAPK 动力学研究,但植物中目前...
Biosensors & bioelectronics
2020
Kim HI, Yim D, Jeon SJ, Kang TW 等 10 人
寡核苷酸在二维纳米片上的非共价吸附与解吸被广泛用于设计快速光学纳米生物传感器,精确控制纳米片界面与寡核苷酸之间的弱相互作用对获得高传感性能至关重要。本文在水溶液中采用四种不同葡聚糖聚合物对超薄二硫化钨(WS2)纳米片界面进行工程化,以调控DNA探针的吸附动力学和热力学。经羧甲基葡聚糖(CM-dex-WS2)或三甲基铵修饰葡聚糖(TM...
The Analyst
2020
Wang M, Wang M, Zhang F, Su X
本研究基于氮掺杂碳点(N-CDs)构建了一种用于α-葡萄糖苷酶(α-glu)及其抑制剂阿卡波糖(acarbose)检测的比率荧光传感平台。α-glu可催化α-熊果苷(α-arbutin)水解释放对苯二酚(HQ),生成的HQ在碱性条件下被氧化并与聚乙烯亚胺(PEI)共聚,形成具有510 nm黄绿色荧光的PHQ-PEI共聚物。PHQ-P...
The international journal of biochemistry & cell biology
2020
Moeyaert B, Dedecker P
遗传编码生物传感器是可视化活细胞内外分析物或生物学过程时空动态不可或缺的工具。过去二十余年,随着面向新分析物或新过程的传感器不断开发,其功能、稳健性和应用范围持续提升。本综述重点介绍遗传编码生物传感器设计中的近期进展,尤其关注新颖且创新的支架,这些支架有望为未来传感与成像开辟新的可能性。文章首先概述传感域与报告域的基本设计原则,包括...
Structure (London, England : 1993)
2020
Trachman RJ, Cojocaru R, Wu D, Piszczek G 等 7 人
荧光RNA适配体可用作细胞内生物传感器报告模块和转录本追踪标签。此前通过SELEX与微流控荧光分选获得三种能激活TO1-Biotin荧光的Mango适配体:Mango-II、Mango-III和Mango-IV,其中Mango-IV在固定和活哺乳动物细胞中成像RNA效果最佳。为阐明其细胞活性机制,作者测定了Mango-IV与TO1-...
Analytical chemistry
2020
Nguyen D, Behrens DM, Sen S, Najdahmadi A 等 10 人
蛋白质工程分子传感器为敏感结合和检测靶标提供了新方法,并可集成到植入式探针中获取生理信息。本文报道一种基于 Förster 共振能量转移(FRET)的钙离子传感器,与光纤集成形成可测量游离 Ca2+ 的膜封装光纤(MEOF)器件。该器件由填充聚四氟乙烯(PTFE)的传感器矩阵组成,其中包含工程化肌钙蛋白 C(TnC)融合的一对 FR...
The Journal of cell biology
2020
Pfisterer K, Levitt J, Lawson CD, Marsh RJ 等 9 人
板状伪足是富含F-肌动蛋白的细胞周边结构,可感知微环境。Fascin是F-肌动蛋白束化蛋白,对稳定伪足、支持黏附与迁移至关重要,并在多种人类癌症中上调,与侵袭行为和差预后相关。既往研究表明Fascin磷酸化可调控F-肌动蛋白束化及亚细胞定位,但其在伪足内动态变化的调控因素仍不清楚。本研究利用活细胞成像技术和一种Fascin构象生物传...
ACS applied materials & interfaces
2020
Prabha S, Durgalakshmi D, Subramani K, Aruna P 等 5 人
本文报道了无机氮化锌(Zn3N2)纳米颗粒用于植物细胞和动物细胞标记与成像的效率,并显示其具有可忽略的细胞毒性。作者在室温下合成了平均粒径约25 nm的Zn3N2胶体纳米颗粒,其光学带隙为2.8 eV,在可见区415 nm处产生发射。将Zn3N2胶体加入原卟啉、黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、荧光素和中性红等有机染料后,染料发射强度增...
ACS applied materials & interfaces
2020
Afzalinia A, Mirzaee M
本文报道了一种基于寡核苷酸“三明治”杂交和荧光共振能量转移(FRET)策略的新型荧光生物传感器,用于快速、高灵敏、高选择性地检测癌症生物标志物miRNA-155的表达水平。该传感器以改性La(III)金属有机框架(La(III)-MOF)和银纳米颗粒(Ag NPs)作为FRET供体–受体对,通过荧光猝灭实现信号转换。La(III)-...