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cAMP assay for GPCR ligand characterization: application of BacMam expression system.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2015 Mazina O, Allikalt A, Heinloo A, Reinart-Okugbeni R 等 6 人

环磷酸腺苷(cAMP)是多种G蛋白偶联受体(GPCR)的第二信使,细胞内cAMP水平变化常被用于评估GPCR特异性配体的生物活性。FRET生物传感器已用于cAMP检测,其比率敏化发射(SE)检测可在荧光微孔板读仪上实施,但需要细胞表达足够且可重复的传感器蛋白。本章介绍利用BacMam杆状病毒转导系统实现cAMP FRET生物传感器(...

Chemical cell-surface receptor engineering using affinity-guided, multivalent organocatalysts.

Journal of the American Chemical Society 2011 Wang H, Koshi Y, Minato D, Nonaka H 等 8 人

催化剂有望作为化学蛋白质修饰工具,但催化剂或催化反应在蛋白质中的应用近期才开始,主要限于体外。通过显著改进我们此前报道的亲和引导DMAP(4-二甲基氨基吡啶,AGD)催化剂,本文发展了一种基于有机催化剂的新方法,可在活细胞表面受体蛋白上实现特异性化学酰化。催化剂由一组多价DMAP基团(酰基转移催化剂)与靶蛋白特异性配体融合而成。体外...