神经元在不同时空尺度上整合输入，理解 G 蛋白偶联受体（GPCR）介导信号事件的时序对阐明神经系统药物作用机制至关重要。活细胞中信号动力学的测量因荧光生物传感器和染料的采用而发生转变，这些工具将生物信号转换为可用显微成像或荧光酶标仪记录的光学信号。本文介绍这些方法的应用实例：（1）利用 cAMP 和 arrestin 生物传感器对阿...
β2-肾上腺素受体（β2-AR）是典型的G蛋白偶联受体，也是具有重要生理与疾病相关性的药理学靶点。本文报道了Photoazolol-1至3（PZL-1–3）一系列可光切换的偶氮苯β2-AR拮抗剂，其活性可被光可逆调控。这些光致变色配体基于偶氮化策略设计，以p-乙酰氨基偶氮苯取代多种β2-AR拮抗剂中的疏水基团。作者利用基于荧光共振能...
我们建立了一种用于检测作用于G蛋白偶联受体（GPCR）肽类的新功能筛选系统。肽类因分子大小介于小分子药物与抗体之间，且可靶向膜蛋白及胞内蛋白-蛋白相互作用，是潜在药物骨架。噬菌体展示技术虽可用于筛选作用于GPCR的肽，但其基于结合能力而非功能活性，难以确认所获肽是否具有生物活性。本系统以酿酒酵母作为肽分泌生产细胞，以稳定表达胰高血糖...
环磷酸腺苷（cAMP）是多种G蛋白偶联受体（GPCR）的第二信使，细胞内cAMP水平变化常被用于评估GPCR特异性配体的生物活性。FRET生物传感器已用于cAMP检测，其比率敏化发射（SE）检测可在荧光微孔板读仪上实施，但需要细胞表达足够且可重复的传感器蛋白。本章介绍利用BacMam杆状病毒转导系统实现cAMP FRET生物传感器（...
环磷酸腺苷（cAMP）是与生物体健康状态密切相关的重要小分子信号分子。为实现对 cAMP 的高灵敏、高特异检测，本文设计了一种基于 RNA 适配体和电化学阻抗谱（EIS）的电化学生物传感器，并在金电极表面电沉积金纳米粒子（AuNPs）以增强传感性能。该适配体传感器在 PBS 缓冲液中具有 50 pM 至 250 pM 的有效测量范围...
肾性尿崩症（NDI）可由肾脏2型血管加压素受体（V2R）功能缺失突变引起。本研究鉴定一名NDI患者中已报道但未表征的V2R N321K错义突变。作者构建高灵敏度Epac型生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器，在激动剂刺激瞬时转染V2R的HEK293细胞后实时测量cAMP；并用BRET检测β-arrestin结合，用抗HA-Al...
环磷酸腺苷（cAMP）是多种G蛋白偶联受体（GPCR）的第二信使，也是评价GPCR特异性配体生物活性的有用读出分子。本文报道了一种基于Förster共振能量转移（FRET）的cAMP生物传感器Epac2-camps，并将其与杆状病毒BacMam转导系统相结合。所构建的BacMam-Epac2-camps病毒转导系统可简便、稳健地在多...
多巴胺受体与其他受体亚型的相互作用可能调节多巴胺相关功能与行为。痕量胺相关受体1（TAAR1）是一种Gs蛋白偶联受体，可被β-苯乙胺（β-PEA）和酪胺等痕量胺激活，并可能通过调节多巴胺能神经元放电或改变多巴胺D2受体（D2R）对配体的反应性影响多巴胺能系统。本研究利用cAMP生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器，发现D2R拮...