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Iterative screening methodology enables isolation of strains with improved properties for a FACS-based screen and increased L-DOPA production.

Scientific reports 2019

为优化微生物宿主以大规模生产高价值代谢物,常需对宿主基因组进行多轮突变与改造。本文报道了一种基于流式细胞分选(FACS)富集 L-DOPA 酶联生物传感器的三轮筛选策略,用于提高酿酒酵母中 L-DOPA 产量。该方法仅构建一次带条形码的体外转座子介导基因破坏文库,并通过同源重组将同一文库整合到每轮更新后的背景菌株中,从而避免每轮重新...

全细胞生物传感器 L-DOPA荧光筛选FACS酵母代谢工程

Development of a biosensing platform based on a laccase-hydrophobin chimera.

Applied microbiology and biotechnology 2019 Sorrentino I, Giardina P, Piscitelli A

本研究通过基因融合将来自 Pleurotus ostreatus 的漆酶 POXA1b 与可自组装、具有粘附性的 I 类疏水蛋白 Vmh2 连接,构建漆酶-疏水蛋白嵌合体,并在毕赤酵母中表达、分泌至培养上清。未经进一步纯化的粗上清可直接涂覆聚苯乙烯 96 孔板,实现简单、稳定且低化学消耗的酶固定化。与野生型重组漆酶相比,基因融合提高...

比色生物传感器 漆酶疏水蛋白嵌合蛋白L-DOPA