A Single-Component Luminescent Biosensor for the SARS-CoV-2 Spike Protein.
现有蛋白检测多依赖高度功能化的抗体试剂，存在表达基础设施要求高、需化学修饰固定或偶联、且常需多种抗体等局限。本文设计了一种单组分、重组、化学发光生物传感器 S-BAT，可在大肠杆菌和酿酒酵母中表达。该传感器将计算设计的小型结合蛋白 LCB1 与 NanoBiT 分裂荧光素酶 SmBiT 和 LgBiT 串联融合；未结合抗原时分裂酶重...
Experimental and Analytical Framework for "Mix-and-Read" Assays Based on Split Luciferase.
免疫检测如酶联免疫吸附试验（ELISA）在即时检测中常受限于蛋白固定化、多步结合与洗涤。本文提出基于分裂荧光素酶的简单模块化“混合即读”酶互补实验与分析框架，用于溶液中分析物的敏感检测与定量。针对目标分析物非重叠表位的两个工程化蛋白结合子分别融合到无活性荧光素酶片段，形成生物传感器探针。通过酵母表面展示从Sso7d突变组合库分离靶向...
A homogeneous bioluminescent immunoassay for parallel characterization of binding between a panel of antibodies and a family of Fcγ receptors.
Fc工程化日益用于调节治疗性抗体与多种Fc受体的相互作用，以改善疗效和安全性。其中，免疫细胞表面的Fcγ受体（FcγRs）可介导抗体依赖性细胞毒作用（ADCC）和抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP），因此抗体发现过程中常需测定抗体Fc域与FcγR（Fc/FcγR）的结合亲和力。为支持高通量筛选，作者基于NanoBiT发光蛋白互补技术开...
A Dual-Purpose Real-Time Indicator and Transcriptional Integrator for Calcium Detection in Living Cells.
钙离子是真核细胞中普遍存在的第二信使，与神经元活动、T细胞活化等过程密切相关。实时钙指示剂（如GCaMP）可提供毫秒级动态成像，而新型钙积分器可将短暂钙活动转化为稳定基因表达。本文报道LuCID，一种兼具实时指示与转录积分功能的双用途钙探针。LuCID的钙依赖型split luciferase组分利用NanoBiT系统，在furim...