The Biochemical journal
2011
Kunzelmann S, Webb MR
开发新型荧光方法检测关键生物分子对基础研究和药物发现具有重要意义。ADP和GDP是细胞内多种反应的产物,包括核苷三磷酸酶和激酶催化的反应。本实验室此前基于细菌肌动蛋白同源物ParM的荧光团加合物开发了ADP生物传感器。本研究证明其中一种传感器——四甲基罗丹明标记的ParM(rhodamine–ParM)也可监测GDP。该传感器能在毫...
ACS chemical biology
2010
Hackney DD
本文评论并介绍一种用于检测腺苷二磷酸(ADP)的简单荧光生物传感器。ADP 是许多代谢反应的产物,实时检测 ADP 可用于监测 ATP 酶、激酶等反应进程。传统耦合酶法步骤较多且存在多个潜在干扰点,而单试剂生物传感器可提供更简单的实时检测。该领域的主要难点在于 ADP 与 ATP 结构高度相似,酶反应体系中 ATP 常大量过量,因此...
ACS chemical biology
2010
Kunzelmann S, Webb MR
ADP 荧光检测在基础研究和药物发现中具有重要价值,因为 ADP 是 ATPase 和激酶反应的通用产物。本文报道一种基于四甲基罗丹胺(TMR)标记细菌肌动蛋白同源物 ParM 的新型无试剂荧光生物传感器。该传感器利用 ParM 结合 ADP 时发生的大幅度构象变化,以及 TMR 染料堆叠导致的强荧光猝灭。ParM 在两个邻近位点共...
The Journal of biological chemistry
2009
Kunzelmann S, Webb MR
几乎所有细胞过程都需要 ATP,激酶和 ATP 水解酶均通过裂解末端磷酸释放 ADP。尽管 ATP 水解是生物系统中最基本的反应之一,目前直接测量酶促 ATP 转化的方法有限。本文报道了一种用于 ADP 的无试剂生物传感器,可实时检测酶促产生的 ADP。该传感器以细菌肌动蛋白同源物 ParM 为蛋白支架,在核苷酸结合位点边缘连接单一...