Bis-enzyme cascade CRISPR-Cas12a platform for miRNA detection.
微小RNA(miRNA)在多种疾病病理发展中发挥重要作用,被视为诊断和预后潜在生物标志物。本文提出一种结合T7 RNA聚合酶与CRISPR-Cas12a的双酶级联平台(BPTC)用于miRNA检测。该平台将phi29 DNA聚合酶介导的RNA到DNA转换/扩增能力与CRISPR-Cas12a反式切割活性相结合。目标miRNA与识别s...
微小RNA(miRNA)在多种疾病病理发展中发挥重要作用,被视为诊断和预后潜在生物标志物。本文提出一种结合T7 RNA聚合酶与CRISPR-Cas12a的双酶级联平台(BPTC)用于miRNA检测。该平台将phi29 DNA聚合酶介导的RNA到DNA转换/扩增能力与CRISPR-Cas12a反式切割活性相结合。目标miRNA与识别s...
本文报道了一种用于病原菌检测的简单、稳健的荧光传感策略,该策略将phi29 DNA聚合酶的双重功能与等温环状链置换聚合(ICSDP)相结合。检测依赖目标物触发成熟引物的形成,在双功能phi29辅助下启动环状链置换聚合反应,从而实现目标物的放大检测。据作者所知,这是首次将双功能phi29辅助ICSDP用于病原菌的荧光传感。策略中引入发...
本文首次研究了由 phi29 DNA 聚合酶(phi29)介导的目标诱导循环链置换扩增(SDA),并将其应用于 signal-off 电化学发光(ECL)生物传感器以检测微小 RNA(miRNA)。目标 miRNA 可触发 phi29 介导的 SDA,产生大量序列准确完整的单链 DNA(assistant probe)。随后,ass...
本文开发了一种用于高灵敏检测 H5N1 流感病毒的等温扩增方法。锁式探针(padlock probe, PLP)特异性结合 H5N1 靶序列,并在 T4 DNA 连接酶作用下环化。随后,以 Phi29 DNA 聚合酶为催化酶,对环化探针进行超支化滚环扩增(HRCA),生成大量双链 DNA 产物。SYBR Green 染料嵌入扩增产生...