Cell structure and function
2017
Li C, Imanishi A, Komatsu N, Terai K 等 7 人
基于 Förster/荧光共振能量转移(FRET)的基因编码生物传感器是研究细胞和组织内信号分子时空调控的通用工具。开发蛋白激酶 FRET 生物传感器最困难的任务之一是鉴定可用于 FRET 探针的激酶特异性底物肽。为解决该问题,我们利用激酶相互作用底物筛选(KISS)技术推导目标蛋白激酶的共识底物序列。本文表明,由 KISS 鉴定的...
Analytical biochemistry
2009
Vaasa A, Viil I, Enkvist E, Viht K 等 7 人
本文报道了一种高亲和力双底物荧光探针ARC-583(Adc-Ahx-(D-Arg)6-D-Lys(5-TAMRA)-NH2),并描述了其在荧光偏振/各向异性结合与置换实验中的应用,用于表征cAMP依赖性蛋白激酶PKA和Rho激酶ROCK的ATP竞争性抑制剂及蛋白/肽底物竞争性抑制剂。该探针与PKA的结合解离常数为0.48 nM,因而...
Experimental cell research
2008
El-Sibai M, Pertz O, Pang H, Yip SC 等 9 人
Rho GTP酶是调控细胞形态和肌动蛋白细胞骨架的关键分子开关。已有研究表明,Rac1和Cdc42分别调控迁移细胞前缘的板状伪足和丝状伪足形成,而RhoA主要介导细胞后部收缩;但近期报道发现迁移细胞前缘存在RhoA/ROCK激活区。本研究利用基于FRET的RhoA生物传感器,在EGF刺激的MTLn3癌细胞中实时监测RhoA活性,发现...