The Journal of cell biology
2019
O'Shaughnessy EC, Stone OJ, LaFosse PK, Azoitei ML 等 14 人
光片显微镜(LLSM)因降低光漂白并具备出色的三维时空分辨率而具有重要价值。利用 LLSM 对活细胞中的生物传感器成像,可前所未有地可视化蛋白质构象或翻译后修饰的快速局部变化。然而,LLSM 生物传感器成像所需的计算处理对许多软件包具有挑战性:即使简单旋转细胞渲染或测试用户可选参数,也需要处理大量数据;光片成像在阈值分割和比值成像方...
Science signaling
2013
Takahashi T, Shibasaki T, Takahashi H, Sugawara K 等 8 人
本文研究抗糖尿病磺脲类药物(SU)与cAMP协同激活Epac2A的机制。作者利用MIN6-K8s细胞中的Epac2A FRET荧光传感器,检测8-pCPT-2'-O-Me-cAMP-AM(8-pCPT)及多种SU药对Epac2A的激活。结果显示8-pCPT浓度依赖性地降低FRET效率;格列本脲、格列吡嗪、乙酰己脲在≥10 μM,格列...
Chemistry & biology
2011
Herbst KJ, Coltharp C, Amzel LM, Zhang J
磺脲类药物(SUs)是治疗2型糖尿病的常用口服药,传统上通过结合磺脲类受体(SUR)刺激胰岛β细胞分泌胰岛素。近期研究发现SUs还可激活cAMP直接激活的交换蛋白2(Epac2),但其分子机制尚不清楚。本研究利用FRET荧光生物传感器成像和生化分析,证明SUs通过直接结合Epac2激活该蛋白及其下游信号。突变分析与分子对接鉴定出Ep...