An overview and future prospects on aptamers for food safety.
许多细菌可存在于蔬菜、水和医疗器械中,并导致人与植物感染,而多数细菌检测方法耗时长、需数天才能出结果。适配体是用于快速可靠检测食品中细菌的有前景替代技术。经SELEX或cell-SELEX筛选获得的适配体为DNA或RNA寡核苷酸,能以高亲和力和特异性结合细菌或其他目标分子;该技术通过多轮去除非结合寡核苷酸,保留可特异性结合目标菌的适...
许多细菌可存在于蔬菜、水和医疗器械中,并导致人与植物感染,而多数细菌检测方法耗时长、需数天才能出结果。适配体是用于快速可靠检测食品中细菌的有前景替代技术。经SELEX或cell-SELEX筛选获得的适配体为DNA或RNA寡核苷酸,能以高亲和力和特异性结合细菌或其他目标分子;该技术通过多轮去除非结合寡核苷酸,保留可特异性结合目标菌的适...
适配体是短单链 DNA、RNA 或合成 XNA 分子,可通过体外筛选获得,以高亲和力和高特异性识别几乎任何目标分子。它们已广泛用于基础研究发现、食品安全保障和环境监测,并在临床诊断和治疗中展现出应用前景。本综述更新该快速进展领域的最新进展,重点介绍适配体的生成方法及其在生物传感、生物技术和医学中的应用。文章还讨论了适配体在靶标特异性...
自系统性进化指数富集(SELEX)方法建立以来,适配体作为生物识别元件在传感检测中发挥了重要作用。微器件系统具有试剂消耗低、样品通量高、可一次性使用等优势,因此基于微流控的适配体传感器在分析检测中的应用需求不断增加。本综述首先介绍适配体传感器的基本概念,随后系统总结微器件适配体传感器在多种平台上的先进应用。文中涵盖微流控芯片、纸基微...
能够结合目标后发生结构转换的适配体生物传感器为分子检测提供了有力策略。然而,将适配体改造为结构转换生物传感器的过程具有挑战性,常依赖试错,且缺乏成熟设计原则。本文作为传感器专题综述,系统考察了将结构转换功能引入现有适配体的多种设计策略,包括适配体信标、分裂适配体传感器和链置换传感器,并通过热力学分析突出影响其性能的关键变量。文章还介...
适配体是通过体外系统进化指数富集(SELEX)获得的单链 DNA 或 RNA 分子,能够高亲和力、高选择性结合特定目标物。与抗体相比,适配体具有免疫原性低、可低成本大规模合成、批次差异小、物理稳定性较好且易于化学修饰等优势,因此被广泛用于治疗、诊断和生物传感平台开发。然而,适配体的商业化进展仍较慢,主要限制包括易被核酸酶降解、肾清除...
适配体是高亲和力单链核酸或蛋白质配体,特异性与亲和力可媲美甚至超过抗体,可通过系统进化指数富集(SELEX)在体外筛选。其功能依赖独特三级结构和折叠形成的结合口袋,解离常数常为皮摩尔至低纳摩尔。稳定、低毒的适配体可针对小分子至大蛋白,并用于治疗、诊断、生物传感器和生物成像。相比抗体,适配体可化学合成,成本低、审批简便、免疫原性低。H...
2017年9月22—23日,约150名参会者参加了在法国波尔多交易所宫举办的‘Aptamers in Bordeaux’研讨会。来自世界各地的30位报告人作了学术报告,内容涵盖适配体的筛选流程、适配体化学及其创新应用,并强调这类强效工具相对于抗体的显著优势。除呈现出色的科学内容外,与会者之间的热烈讨论和富有成效的交流也使本次会议取得...
本研究基于适配体二级结构及其与铜的结合亲和力,预测了适配体中潜在的铜结合位点。在通过 SELEX 筛选并检测的 4 个适配体(Cu-A1 至 Cu-A4)中,Cu-A2 对铜的结合亲和力最高,其 KD 值最低,为 1.83×10−11 M。为验证铜是否结合于预测区域,作者采用突变和缺失分析对结合亲和力进行实验验证,结果表明高 G–C...
本报告总结了2016年6月24日至25日在波尔多举行的‘Aptamers in Bordeaux’研讨会。会议围绕适配体的体外选择、结构表征及其在分析、诊断和治疗中的应用展开,涵盖天然与人工核糖开关、RNA调控机制、突变聚合酶和化学修饰核苷酸碱基赋予适配体新功能的最新进展。报告还介绍了适配体平台在多种重大疾病生物标志物多路复用分析中...
适配体是通过体外定向化学进化(SELEX,系统进化指数富集配体)筛选得到的短单链寡核苷酸,可特异性结合目标分子。SELEX 能够针对多种高、低分子量靶标筛选适配体,应用范围涵盖生物传感器技术、抗肿瘤药物发现等。首个适配体药物 Macugen 于 2004 年获 FDA 批准用于临床,此后已有十余种适配体药物处于不同阶段临床试验。从药...
小分子在人体生理过程以及药物、毒素和化学品中发挥重要作用,因此检测与定量小分子的工具需求很高。本综述系统概述了能够识别小分子的适配体及其筛选方法,重点讨论该领域的现状、优势、存在问题及可能解决方案。文章回顾了系统进化指数富集(SELEX)技术用于小分子靶标时面临的限制,包括靶标固定化导致相互作用位点减少、溶液结合能力不足、亲和测定方...
适配体是单链合成寡核苷酸,可折叠成三维结构,以高亲和力和特异性非共价结合靶分子。它们通过体外系统进化指数富集(SELEX)获得,经筛选和表征后用于治疗、生物传感等多种应用。本综述聚焦毒素、抗生素、分子标志物、药物和重金属等小分子靶标适配体。准确检测这些分子对保障人和动物健康至关重要,但小分子靶标分子量低,且与寡核苷酸尺寸差异显著,使...
适配体是可通过折叠形成三级结构、以高亲和力和高特异性结合靶标的合成单链 DNA 或 RNA 序列。本文报道了首次通过体外选择(SELEX)筛选并鉴定能够识别生物胺酪胺的 DNA 适配体。针对小分子靶标选择困难的问题,作者对 SELEX 策略进行系统改良,通过负选择、反选择、逐步缩短孵育时间、改变洗脱条件并增加选择轮次来提高选择严格性...
结核病仍是全球重大公共卫生问题,2011 年约有 900 万新发病例和 140 万死亡。为控制结核及其他传染病,世界卫生组织推荐 ASSURED 诊断工具,即经济、敏感、特异、易用、快速稳健、无需设备并可送达终端用户。适配体有望用于结核即时诊断。本研究采用指数富集系统进化(SELEX)筛选可识别结核分枝杆菌 H37Ra 的单链 DN...
纳米尺度适配体(Aptamers, Aps)是短单链 DNA 或 RNA 寡核苷酸,可高亲和力特异性结合靶标,因而被视为强效诊断与分析传感工具,即适配体传感器。适配体通过系统进化指数富集(SELEX)从随机寡核苷酸库中筛选获得。本文综述并讨论适配体传感器领域最新研究,重点探讨其多分析物检测潜力。由于适配体在分析物存在下具有特异性折叠...
系统进化指数富集配体(SELEX)技术于1990年提出,已成为识别和筛选适配体的重要工具。适配体是一类短寡核苷酸,能以高选择性和高亲和力识别并结合相应靶标,因而成为传统抗体的有吸引力替代品,尤其具有更稳定的优势。同时,适配体在食品质量与安全管理等不同领域得到广泛应用。本综述首先介绍SELEX的筛选过程及其发展演变,随后总结适配体在食...
N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)是多种哺乳动物中丰富的唾液酸,广泛存在于后口动物糖缀合物中,也出现在人肿瘤和胎儿新鲜样品中。由于现有分析探针有限,Neu5Gc 的表达水平和生物学功能仍知之甚少。本研究首次报道通过系统进化指数富集配体(SELEX)筛选特异性结合 Neu5Gc 的 DNA 适配体。经过15轮筛选、克隆测序和酶联免疫吸...
适配体对生物大分子、病毒和细胞等靶标的识别是适配体生物传感器平台及蛋白功能研究的关键。然而,对于难以纯化和定量、甚至尚未明确定义的靶标,评价适配体与其靶标之间的结合常数十分困难。为此,作者开发了一种基于改进毛细管电泳(CE)的方法,用于测定靶标难以定量时适配体的解离常数(Kd)。以人凝血酶及其已知适配体(TBA)为模型验证该方法,结...
近年来,适配体因兼具抗体的识别优势并具备热稳定性高、成本低、应用范围广泛等独特优点而受到关注。本综述阐述了适配体作为抗体替代物的原因,详细介绍了多种体外筛选方法,包括硝酸纤维素膜过滤、亲和层析、磁珠和毛细管电泳等 SELEX 策略。文章进一步介绍了适配体在疾病诊断和小分子检测中的多种应用,并指出由于适配体易于化学修饰且稳定性好,电化...
适配体是通过系统进化指数富集(SELEX)筛选得到的单链DNA或RNA寡核苷酸,能依靠氢键、静电作用和疏水作用而非Watson–Crick碱基配对,对多种靶标分子实现高亲和力和高特异性识别。适配体分子量低、可化学修饰,且在反复变性与复性后仍保持稳定,因此可作为抗体的替代识别元件用于多种诊断检测。本文综述了适配体在荧光、电化学、纳米标...