Biosensors & bioelectronics
2013
Gong S, Ren HL, Tian RY, Lin C 等 13 人
N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)是多种哺乳动物中丰富的唾液酸,广泛存在于后口动物糖缀合物中,也出现在人肿瘤和胎儿新鲜样品中。由于现有分析探针有限,Neu5Gc 的表达水平和生物学功能仍知之甚少。本研究首次报道通过系统进化指数富集配体(SELEX)筛选特异性结合 Neu5Gc 的 DNA 适配体。经过15轮筛选、克隆测序和酶联免疫吸...
Analytical and bioanalytical chemistry
2013
Zhang YW, Yan HY, Fu P, Jiang F 等 7 人
适配体对生物大分子、病毒和细胞等靶标的识别是适配体生物传感器平台及蛋白功能研究的关键。然而,对于难以纯化和定量、甚至尚未明确定义的靶标,评价适配体与其靶标之间的结合常数十分困难。为此,作者开发了一种基于改进毛细管电泳(CE)的方法,用于测定靶标难以定量时适配体的解离常数(Kd)。以人凝血酶及其已知适配体(TBA)为模型验证该方法,结...
BMC research notes
2012
Bruno JG, Carrillo MP, Richarte AM, Phillips T 等 6 人
核酸适配体已显示可结合病毒包膜蛋白并抑制病原病毒感染。本文报道针对多种高致病性虫媒病毒(包括基孔肯雅、克里米亚-刚果出血热、登革热、蜱传脑炎和西尼罗河病毒)的重组包膜蛋白、合成肽及灭活全病毒进行 DNA 适配体库开发与筛选的初步工作。作者利用磁珠 SELEX 获得候选适配体,通过酶联适配体吸附试验(ELASA)按 405 nm 吸光...
Sensors (Basel, Switzerland)
2012
Song KM, Lee S, Ban C
近年来,适配体因兼具抗体的识别优势并具备热稳定性高、成本低、应用范围广泛等独特优点而受到关注。本综述阐述了适配体作为抗体替代物的原因,详细介绍了多种体外筛选方法,包括硝酸纤维素膜过滤、亲和层析、磁珠和毛细管电泳等 SELEX 策略。文章进一步介绍了适配体在疾病诊断和小分子检测中的多种应用,并指出由于适配体易于化学修饰且稳定性好,电化...
Biosensors & bioelectronics
2012
Citartan M, Gopinath SC, Tominaga J, Tan SC 等 5 人
适配体是通过系统进化指数富集(SELEX)筛选得到的单链DNA或RNA寡核苷酸,能依靠氢键、静电作用和疏水作用而非Watson–Crick碱基配对,对多种靶标分子实现高亲和力和高特异性识别。适配体分子量低、可化学修饰,且在反复变性与复性后仍保持稳定,因此可作为抗体的替代识别元件用于多种诊断检测。本文综述了适配体在荧光、电化学、纳米标...
Trends in analytical chemistry : TRAC
2011
Hamula CLA, Zhang H, Li F, Wang Z 等 6 人
特异性识别微生物细胞和病毒的DNA适配体具有多种分析与治疗应用。本文综述了针对特定病原(如活细菌、完整病毒颗粒及病毒感染哺乳动物细胞)的适配体开发进展。通过SELEX和细胞SELEX,可从纯化病原分子或完整活细胞中筛选高亲和适配体;这些适配体可作为亲和试剂用于夹心检测、细胞标记与成像、流式细胞术分析,并作为探针开发全细胞生物传感器。...
Journal of biomolecular screening
2011
Choi JS, Kim SG, Lahousse M, Park HY 等 9 人
炭疽杆菌(Bacillus anthracis)分泌的保护抗原(protective antigen, PA)是重要的毒力因子,也被选作细菌感染检测的生物标志物。本研究采用系统进化指数富集(SELEX)技术,从随机单链 DNA 文库中筛选能紧密结合 PA63 的寡核苷酸适配体。经过 8 轮体外筛选,获得 4 个含 30 个碱基序列的...
Analytical and bioanalytical chemistry
2010
Zhou J, Battig MR, Wang Y
核酸适配体是一类通过系统进化配体指数富集(SELEX)筛选获得的合成单链核酸配体,能够以高亲和力和高特异性识别小分子、蛋白质、细胞等多种靶标,并耐受较苛刻的化学、物理和生物条件,因而成为生物传感器中极具潜力的分子识别元件。本综述首先简要介绍适配体发现的上游筛选与下游截断方法,包括随机库构建、结合-分离-扩增循环、亲和分离、结构预测、...
Expert opinion on biological therapy
2008
Pan W, Clawson GA
催化RNA酶(CRz)在多种生物体中天然存在,而催化DNA酶(CDz/DNAzyme)则通过随机序列库的体外选择/进化获得。本文简要概述CDz的体外直接选择方法、理化性质与功能,并讨论其未来应用。作者重点介绍直接选择策略,即利用目标催化事件本身从随机DNA库中筛选具有催化活性的序列,并讨论序列多样性引入、突变、重组、DNA再扩增及进...