Calcium dynamics change in degenerating cone photoreceptors.
锥体感光细胞对高分辨率昼视和色觉至关重要,遗传性视网膜疾病中锥体丢失严重影响视觉,但锥体死亡机制不清。既往研究提示钙稳态缺陷在感光细胞退行中起核心作用,但缺乏哺乳动物退行锥体中钙的生理测量。本研究利用 HR2.1:TN-XL 转基因小鼠,该品系在锥体中特异性表达遗传编码钙生物传感器 TN-XL,并与原发性锥体退行模型 cpfl1 和...
锥体感光细胞对高分辨率昼视和色觉至关重要,遗传性视网膜疾病中锥体丢失严重影响视觉,但锥体死亡机制不清。既往研究提示钙稳态缺陷在感光细胞退行中起核心作用,但缺乏哺乳动物退行锥体中钙的生理测量。本研究利用 HR2.1:TN-XL 转基因小鼠,该品系在锥体中特异性表达遗传编码钙生物传感器 TN-XL,并与原发性锥体退行模型 cpfl1 和...
视网膜锥体光感受器负责昼视和色觉,其退行性病变常导致多种视网膜疾病致盲。钙离子是光感受器信号转导与代谢中的关键第二信使,并被认为与光感受器退行性变间接相关。然而,系统研究锥体生理与病理生理受到小鼠中锥体数量少、电生理记录困难等限制。为此,作者建立了一种双光子钙成像方案,使用转基因小鼠 HR2.1:TN-XL,在人红视蛋白启动子 HR...
荧光寿命成像(FLIM)是一种可与共聚焦成像结合的强有力成像模式。基于分子内 Förster 共振能量转移(FRET)的生物传感器中,供体荧光衰减时间的变化可提供内在定量信息。本文描述了一种用于定量钙离子(Ca2+)成像的共聚焦 FLIM 方案,采用以肌钙蛋白 C 为 Ca2+ 感应单元的基因编码 FRET 钙传感器 TN-XL,并...
钙离子介导多种神经元功能,视网膜锥体光感受器因区室化明显,是研究钙信号多样性的理想模型。在生理条件下测量锥体亚细胞钙信号对理解锥体功能及视网膜神经退行性病变具有重要意义,但光敏外节邻近其他区室,使光诱导钙响应的光学测量困难。作者构建了转基因小鼠 HR2.1:TN-XL,使短波和中波敏感锥体选择性表达基因编码比率型钙传感器 TN-XL...
基因编码钙指示剂(GECIs)可在模式生物中实现钙离子成像,但其表达通常受单一启动子控制,可能超出目标细胞类型。为提高细胞类型特异性,可将 GECI 置于两个启动子交叉表达的控制下。本文利用来自 Nostoc punctiforme 的分裂 DnaE intein(NpuDnaE)介导两种代表性 GECI(TN-XL 和 GCaMP...