Frontiers in cellular neuroscience
2021
Hoare SRJ, Tewson PH, Sachdev S, Connor M 等 6 人
神经元在不同时空尺度上整合输入，理解 G 蛋白偶联受体（GPCR）介导信号事件的时序对阐明神经系统药物作用机制至关重要。活细胞中信号动力学的测量因荧光生物传感器和染料的采用而发生转变，这些工具将生物信号转换为可用显微成像或荧光酶标仪记录的光学信号。本文介绍这些方法的应用实例：（1）利用 cAMP 和 arrestin 生物传感器对阿...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2015
Mazina O, Allikalt A, Heinloo A, Reinart-Okugbeni R 等 6 人
环磷酸腺苷（cAMP）是多种G蛋白偶联受体（GPCR）的第二信使，细胞内cAMP水平变化常被用于评估GPCR特异性配体的生物活性。FRET生物传感器已用于cAMP检测，其比率敏化发射（SE）检测可在荧光微孔板读仪上实施，但需要细胞表达足够且可重复的传感器蛋白。本章介绍利用BacMam杆状病毒转导系统实现cAMP FRET生物传感器（...
Journal of biomolecular screening
2012
Mazina O, Reinart-Okugbeni R, Kopanchuk S, Rinken A
环磷酸腺苷（cAMP）是多种G蛋白偶联受体（GPCR）的第二信使，也是评价GPCR特异性配体生物活性的有用读出分子。本文报道了一种基于Förster共振能量转移（FRET）的cAMP生物传感器Epac2-camps，并将其与杆状病毒BacMam转导系统相结合。所构建的BacMam-Epac2-camps病毒转导系统可简便、稳健地在多...