连接蛋白间隙连接（Cx GJs）允许小分子和离子在细胞间传递，对细胞通讯至关重要；其功能障碍与多种疾病相关，因此能调节间隙连接的小分子可能成为治疗药物。为筛选间隙连接调节剂，本研究建立了一种新型细胞检测法。作者以重组表达 Cx43 的 HeLa 细胞为基础，构建供体细胞和生物传感器细胞：供体细胞额外表达 Gs 蛋白偶联腺苷 A2A ...
碳酸氢根在细胞呼吸和pH稳态中起核心作用，但以往活细胞内碳酸氢根浓度变化只能通过胞内pH变化间接测量。本文报道了一种遗传编码、pH无关、基于荧光的单次使用细胞传感测试系统，用于监测活细胞内碳酸氢根浓度变化。该系统由截短可溶性腺苷酸环化酶sACtr和cAMP FRET报告蛋白CEPAC组成：碳酸氢根激活sACtr后催化cAMP合成，c...
环磷酸腺苷（cAMP）是原核和真核生物中重要的第二信使，介导多种生物学功能。为研究 cAMP 信号及其调控，本文基于合成转基因方法开发了一种蛋白型 cAMP 报告系统。作者将大肠杆菌 cAMP 受体蛋白（CRP）与单纯疱疹病毒 VP16 转录激活域融合，构建哺乳动物表达载体 pLA1，形成人工哺乳动物反式激活因子；该因子可浓度依赖地...
本文介绍基于生物发光共振能量转移（BRET）的新型生物传感器在活细胞中实时表征多巴胺D2受体（D2R）与痕量胺相关受体1（TAAR1）药理学和信号转导的方法。D2R和TAAR1等G蛋白偶联受体既可介导G蛋白依赖的cAMP信号，也可介导G蛋白非依赖的β-arrestin2募集信号。利用EPAC cAMP生物传感器可实时监测细胞内cAM...
核苷酸不仅可由神经元释放，也可由成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞和胶质细胞等释放。非神经细胞ATP释放常为Ca2+独立且多非囊泡性，而神经元ATP释放通常被认为通过胞吐发生。为评估神经内分泌细胞核苷酸释放是否包含非囊泡成分，作者将P2Y12受体的自分泌/旁分泌激活作为PC12细胞核苷酸释放的生物传感器。稳定表达肉毒毒素C1轻链（BoN...