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Improved genetically-encoded, FlincG-type fluorescent biosensors for neural cGMP imaging.

Frontiers in molecular neuroscience 2013 Bhargava Y, Hampden-Smith K, Chachlaki K, Wood KC 等 8 人

基因编码生物传感器可实时解析细胞信号。作者改进基于 EGFP 的 cGMP 荧光传感器 FlincG,发现质粒转染 HEK293T 细胞后荧光弱或无,而腺病毒感染成功。测序显示两种构建体在 EGFP 域均有突变,且 C 端 17 氨基酸尾与已发表序列不同。在稳定表达 NO 激活鸟苷酸环化酶和 PDE5 的 HEK293T 细胞中,系...

Real-time monitoring the spatiotemporal dynamics of intracellular cGMP in vascular smooth muscle cells.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2013 Held KF, Dostmann WR

在哺乳动物细胞中实时、非侵入地成像胞内第二信使,同时保持其体内表型,需要结构精密的生物传感器。本文提供了在主动脉血管平滑肌细胞中使用单波长cGMP生物传感器δ-FlincG的方法学。δ-FlincG由含两个cGMP结合域的蛋白激酶GIα(PKGIα)调节域片段与环状置换EGFP(cpEGFP)融合而成,cGMP结合引起荧光强度变化,...