基因编码生物传感器可实时解析细胞信号。作者改进基于 EGFP 的 cGMP 荧光传感器 FlincG，发现质粒转染 HEK293T 细胞后荧光弱或无，而腺病毒感染成功。测序显示两种构建体在 EGFP 域均有突变，且 C 端 17 氨基酸尾与已发表序列不同。在稳定表达 NO 激活鸟苷酸环化酶和 PDE5 的 HEK293T 细胞中，系...
本文研究了固定在磷酰基功能化多壁碳纳米管（MWCNTs）上的血红蛋白（Hb）的直接电子转移与电催化行为。傅里叶变换红外光谱、紫外-可见光谱和循环伏安分析表明，磷酰基功能化 MWCNTs 具有良好的生物相容性，可促进 Hb 与电极之间的电子通信。在 pH 7.0 磷酸盐缓冲液中，固定化 Hb 呈现一对氧化还原峰，形式电位为 -406±...
一氧化氮（NO）和过氧化氢（H2O2）均在心肌细胞内合成，并参与心血管反应调控，但二者在心肌细胞信号中的相互关系尚不清楚。成年小鼠心肌细胞是研究活性氧与活性氮受体调控信号的重要模型，但培养存活时间短且蛋白量有限。本文利用化学传感器和生物传感器开展成年心肌细胞内 H2O2 与 NO 的活体成像研究，详细描述了适合成像的心肌细胞分离与培...
本文采用两步法制备金纳米颗粒-石墨烯复合分散液，构建 GNPs-GR-SDS 修饰电极，并通过滴涂法将血红蛋白固定于基底平面石墨电极表面，研究其直接电化学与电催化性能。结果表明，GNPs-GR-SDS 复合膜显著促进血红蛋白与电极间的直接电子转移，在 pH 7.0 磷酸盐缓冲液中呈现一对清晰、准可逆的血红素 Fe(III)/Fe(I...
在哺乳动物细胞中实时、非侵入地成像胞内第二信使，同时保持其体内表型，需要结构精密的生物传感器。本文提供了在主动脉血管平滑肌细胞中使用单波长cGMP生物传感器δ-FlincG的方法学。δ-FlincG由含两个cGMP结合域的蛋白激酶GIα（PKGIα）调节域片段与环状置换EGFP（cpEGFP）融合而成，cGMP结合引起荧光强度变化，...