荧光寿命成像（FLIM）是一种可与共聚焦成像结合的强有力成像模式。基于分子内 Förster 共振能量转移（FRET）的生物传感器中，供体荧光衰减时间的变化可提供内在定量信息。本文描述了一种用于定量钙离子（Ca2+）成像的共聚焦 FLIM 方案，采用以肌钙蛋白 C 为 Ca2+ 感应单元的基因编码 FRET 钙传感器 TN-XL，并...
本研究开发了一种基于大鼠嗜碱性白血病细胞（RBL-2H3）的荧光生物传感器，用于检测和鉴定鱼类主要过敏原鱼白蛋白（parvalbumin, PV）。作者构建 CD63-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）融合质粒，并通过脂质介导的高效 DNA 转染方法将其导入 RBL 细胞，获得稳定转染的 RBL 细胞系，用于共聚焦激光扫描显微镜（CLS...
本章首先简要介绍荧光与荧光共振能量转移（FRET）的基本原理，随后重点讨论记录FRET最常用的方法，尤其关注广泛用于生物传感器成像的显微镜技术。文中比较了宽场荧光显微镜与激光扫描共聚焦显微镜的仪器选择，说明基于强度（如比率成像、受体光漂白）和基于供体荧光寿命（FLIM）的FRET检测方式，并给出将特定记录方法与具体科学实验相匹配的指...