本研究报道了一种由聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）微流控芯片与有机共混体异质结光电二极管（OPD）阵列集成的多路生物传感器，用于病原体的化学发光检测。在PMMA芯片中分别针对水传播的大肠杆菌O157:H7、空肠弯曲菌和腺病毒进行免疫捕获，并利用聚(2,7-咔唑)/富勒烯OPD检测被捕获病原物产生的化学发光信号。该OPD在425 nm处的...
本文报道了两种新型 PDE4B1 和 PDE4D3 报告细胞系的构建及其药理学表征。这些细胞中胞内 cAMP 水平通过 cAMP 敏感生物传感器进行实时监测。作者利用重组 PDE4B1 和 PDE4D3 报告细胞系表征了多种竞争性及别构 PDE4 抑制剂的细胞效应，并将其细胞活性与体外对全长 PDE4D3 及仅含 PDE4D3 催化...
中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）可引起重症肺炎且病死率超过50%，目前尚无有效抗病毒药物。为快速鉴定MERS-CoV复制抑制剂，作者表达MERS-CoV木瓜样蛋白酶（PLpro）和3C样蛋白酶（3CLpro），并建立基于荧光素酶的生物传感器以监测细胞内蛋白酶活性。结果显示，MERS-CoV PLpro可识别并切割生物传感器...
本文提出一种新型化学发光（CL）生物传感器，用于灵敏检测野生型 p53 蛋白。先将高特异性共识双链寡核苷酸（ds-ODN）预固定于金板表面，用于捕获溶液中的野生型 p53 蛋白；随后用 N-生物素酰-N′-(6-马来酰己酰)肼（biotin-Mi）修饰野生型 p53 分子外表面的半胱氨酸残基，以便结合链霉亲和素-辣根过氧化物酶（SA...
生物发光反应以萤光素、Mg2+-ATP 和分子氧为底物，在萤光素酶催化下生成电子激发态氧化萤光素并释放可见光。萤光素酶最具前景的应用之一是生物传感器。为开发基于半胱天冬酶3/7（caspase 3/7）的凋亡生物传感器，作者通过重叠延伸 PCR 构建了 3 种 Photinus pyralis 萤光素酶的环状置换变体 CP-1、CP...
本研究评估一种可在一个工作日内检测白血病细胞内阿糖胞苷三磷酸（Ara-CTP）水平的体外生物传感器方法。阿糖胞苷是急性髓系白血病常用药物，其细胞毒性主要依赖活性代谢物 Ara-CTP。该传感器采用生物发光、嘧啶依赖且胞苷脱氨酶缺陷的大肠杆菌突变株，将经阿糖胞苷单独或联合氟达拉滨处理的白血病细胞裂解液与传感器共孵育，通过碱性磷酸酶处理...
测量活细胞或生物体内的蛋白酶活性仍具挑战性。本文报道一种转基因编码生物传感器，可高灵敏、高特异报告炎症小体激活过程中 caspase-1 及其他蛋白酶的蛋白水解活性。该蛋白酶报告系统基于前体白介素-1β（pro-IL-1β）与 Gaussia 荧光素酶（GLuc）融合蛋白 iGLuc 的生物学特性：pro-IL-1β 依赖性的蛋白聚...
本研究开发了一种基于适配体的化学发光（CL）方法，用于高选择性和高灵敏度检测血小板衍生生长因子BB（PDGF-BB）。兔抗人PDGF-BB多克隆抗体通过共价偶联固定在具有反应性N-羟基琥珀酰亚胺酯（NOS）基团的96孔板表面。当存在目标蛋白时，生物素化适配体被捕获，形成抗体/PDGF-BB/生物素化适配体三明治复合物；随后链霉亲和素...
受体鸟苷酸环化酶参与多种病理生理过程，是重要的药物靶点。本文报道三种颗粒型鸟苷酸环化酶（pGC）报告细胞系的构建与药理学表征。编码利钠肽受体GC-A、GC-B和热稳定肠毒素受体GC-C的质粒被稳定转染至表达环核苷酸门控（CNG）阳离子通道的父代报告细胞系中，该通道作为胞内cGMP的生物传感器。由此可在活细胞中实时监测pGC活性。利用...