本研究利用噬菌体展示技术从 Ph.D.-7 七肽库中筛选高选择性 Cu(II) 结合肽。通过 5 轮针对 Cu(II)-NTA 磁珠的正向筛选，以及针对 Al(III)、Co(II)、Fe(III)、Ni(II) 和 Zn(II) 等多轮负向筛选，富集到特异性结合 Cu(II) 的 M13 噬菌体。ELISA、SEM 和 EDX 证...
荧光生物传感器是分子成像、检测与药物筛选的重要工具。传统方法通常将荧光基团引入已知配体或结合蛋白，但难以应用于配体未知的靶标，且探针连接位点优化耗时。本文提出一种不依赖已知配体的荧光生物传感器筛选策略，构建了显示设计α-螺旋肽的荧光修饰噬菌体库。该库中肽链被设计为α-螺旋结构，一个用于探针修饰的半胱氨酸位于同一螺旋面的四个随机残基中...
癌胚抗原（CEA）是目前唯一用于结直肠癌（CRC）术前筛查和术后复发监测的血清蛋白生物标志物。现有CRC检测手段存在局限，亟需高灵敏、高特异、快速的诊断装置；多数装置基于抗体，存在多聚体结合、成本高和规模化生产困难等问题。为克服抗体局限，本研究开发Affimer蛋白作为CEA检测的新型替代结合试剂。作者从噬菌体展示库中筛选出特异性结...
本文综述了以噬菌体替代抗体构建生物传感器的研究进展，重点介绍病毒生物电阻器（Virus BioResistor, VBR）的开发。M13噬菌体可通过噬菌体展示技术在其表面展示抗体片段或肽配体，具有成本低、热稳定性好、不易聚集等优势，但完整病毒颗粒无法直接替代现有抗体传感器中的识别元件。作者提出将M13病毒嵌入导电聚合物聚(3,4-乙...
表面展示是一种重组技术，可将目标蛋白表达并锚定在细胞膜表面，适用于从病毒到哺乳动物细胞的几乎所有生物实体。该技术已用于药物筛选、生物催化剂、文库筛选、定量分析和生物传感器等多种生物技术与生物医学应用。本综述讨论表面展示技术在生物传感器中的应用，具体介绍噬菌体展示、革兰氏阴性与革兰氏阳性细菌表面展示以及真核酵母细胞表面展示系统。综述描...
为有效、便捷地检测病原菌，本研究开发了一种基于亲和肽的无标记生物传感器，用于识别目标菌株并实现精确定量检测。研究通过噬菌体展示肽库生物筛选，获得一种对大肠杆菌O157:H7具有较高结合亲和力的12肽；该肽在C端引入三个甘氨酸（G3）和一个半胱氨酸（C）残基，可自组装于金电极表面，从而构建亲和肽修饰电极。结合电化学阻抗谱（EIS），该...
近年来，基于M13噬菌体构建的新型病毒基传感系统受到广泛关注。M13噬菌体具有规则丝状结构、单分散性和可遗传工程改造特性，其pVIII主要衣壳蛋白可通过噬菌体展示技术展示特异性肽段或抗体，从而赋予传感器对化学和生物靶标的高灵敏度与高选择性。M13噬菌体还能在温和条件下通过自组装形成有序薄膜、纳米线或光子晶体结构，并渗入纳米网络，实现...
桔霉素（CIT）是一种在农产品、饲料和红曲产品中检出的真菌毒素。现有检测方法包括薄层色谱、高效液相色谱、生物传感器和免疫分析；免疫分析因快速、经济、简便而常用，但通常需将毒素偶联到载体蛋白或酶上制备竞争抗原，存在引入毒素和污染问题。本研究以抗独特型纳米抗体X27作为CIT模拟抗原，替代有毒标准品，建立基于噬菌体展示的实时免疫-PCR...
噬菌体是一类感染细菌的病毒，因其生物学特性明确且具备多种优势，在生物技术中发挥重要作用。噬菌体展示是指将外源肽或蛋白与噬菌体外壳蛋白融合并表达于噬菌体颗粒表面。2018年，George P. Smith和Gregory P. Winter因“肽和抗体的噬菌体展示”共同获得诺贝尔化学奖的一半。自1985年首次报道以来，该技术已显著发展...
本文报道利用噬菌体展示抗体技术鉴定、工程化和表征针对玉米赤霉烯酮（ZEN）的重组单链可变片段（scFv）抗体。ZEN是一种雌激素样霉菌毒素。为提高获得能结合游离毒素克隆的概率，在生物筛选中交替使用ZEN-BSA和ZEN-OVA偶联蛋白。从人源非免疫噬菌体展示scFv文库中筛选到一个特异性结合游离ZEN的克隆yZEN2A8。将该scF...
PD-L1是B7家族40 kDa跨膜蛋白，也是重要的T细胞调节因子。PD-L1与PD-1结合会抑制T细胞增殖和活化，导致T细胞耗竭；该过程可通过单链可变片段（scFv）融合蛋白阻断PD-L1/PD-1相互作用，或通过药物偶联物直接抑制肿瘤细胞而逆转。本研究利用人源噬菌体展示scFv库，通过亲和生物筛选获得抗PD-L1 scFv，并经...
快速、低成本且灵敏地检测细菌病原体对人类健康与安全具有重要意义。本文提出一种基于细菌细胞与其感染病毒（噬菌体）相互作用的简单细菌种类检测策略。作者对噬菌体 M13 进行工程化改造，使其展示天然靶向目标细菌的噬菌体受体结合蛋白。通过巯基化修饰，工程化噬菌体可结合金纳米颗粒；金纳米颗粒在噬菌体上聚集并作为信号放大器，因表面等离子共振性质...
登革热病毒2型非结构蛋白1（DENV2 NS1）是登革热诊断中特异且敏感的蛋白生物标志物。本研究采用多价噬菌体展示技术从M13随机肽库中筛选可特异性结合NS1的亲和肽，并通过循环伏安法（CV）和电化学阻抗谱（EIS）表征其结合行为。筛选得到序列为EHDRMHAYYLTR的R3#10噬菌体展示肽，其富含组氨酸和精氨酸等碱性残基。与NS...
霍乱毒素是霍乱弧菌的主要毒力因子，若不及时治疗可在数小时内引起严重脱水、休克甚至死亡。本研究通过 M13 噬菌体展示技术筛选出能特异性结合霍乱毒素 B 亚基（CTX-B）的独特短肽。以重组 CTX-B 为靶标进行生物筛选，快速获得氨基酸序列为 VQCRLGPPWCAK 的特异性肽；ELISA 分析表明噬菌体展示肽对 CTX-B 具有...
金黄色葡萄球菌是引起医疗相关和社区获得性感染的重要病原体，早期诊断对阻止疾病进展和减少并发症至关重要。本研究从 M13 噬菌体展示随机九肽库中筛选出能特异性结合金黄色葡萄球菌细胞表面的噬菌体克隆 St.au9IVS5，展示肽序列为 RVRSAPSSS。ELISA 证实其与金黄色葡萄球菌特异性结合；Western blot 表明该噬菌...
军团菌是广泛存在于自然和人工水系统中的革兰阴性菌，人吸入含菌气溶胶后可感染肺泡巨噬细胞，引发军团病。由于军团菌普遍存在且危害健康，饮用水中军团菌浓度必须严格监测，但标准方法仍依赖耗时的培养与形态分析。本研究首次从人源 naïve HAL 抗体库通过噬菌体展示获得抗 L. pneumophila 抗体，并在完整细菌细胞上筛选，以选择特...
噬菌体疗法可追溯近一个世纪，但抗生素的发现使该领域研究与投资迅速减少。近年来，多重耐药菌威胁凸显新抗生素研发严重不足：1983—1987年发现16个分子，20世纪90年代10个新治疗药物，2003—2007年仅5个。因此噬菌体被重新视为替代疗法。噬菌体展示技术在鉴定针对病原体的有效抗体及疫苗开发方面极具前景。同时，传统噬菌体疗法利用...
噬菌体展示技术已成为靶基因表达和靶标特异性配体筛选的有力工具，具有简便、高效、低成本等优点，被广泛用于筛选肽、蛋白质和抗体。通过噬菌体展示，离子、小分子、无机材料、天然与生物高分子、纳米结构、细胞、细菌乃至组织等多种靶标均可获得特异性结合配体。经噬菌体展示筛选得到的噬菌体及靶标特异性配体已作为亲和试剂广泛应用于治疗、诊断和生物传感器...
幼年特发性关节炎（JIA）目前缺乏特异性诊断标志物，诊断主要依赖临床表现和排除性血液检查。为筛选能识别多种JIA亚型循环自身抗体的新表位抗原（模拟表位），作者用JIA患者血清纯化IgG筛选噬菌体展示随机七肽库，并通过ELISA验证所选肽对JIA患者、健康儿童及其他自身免疫病患者血清IgG的免疫反应性。融合于噬菌体颗粒的PRF+1肽能...
本研究利用迭代亲和选择，从 Tomlinson I+J 噬菌体展示库中分离出特异性结合小分子生物标志物 L-肉碱（L-Carnitine）的单链抗体片段（scFv）克隆。L-肉碱是人类的条件必需营养素，尿液中异常升高与 2 型糖尿病、肺癌等疾病相关。ELISA 亲和表征显示，筛选得到的结合物在关键生物选择材料和密切相关 L-肉碱衍生...