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插入/缺失(indels)变异是多种疾病发展的有前景标志物,但现有基因分型方法繁琐、复杂且需昂贵仪器和复杂数据分析,难以满足即时检测需求。本文提出一种快速准确的生物传感器(T-ARMS-PCR-LFA),将四引物扩增性突变系统聚合酶链反应(T-ARMS-PCR)与 GoldMag 侧流层析试纸条(LFA)相结合,用于血管紧张素转换酶...
插入/缺失(indels)变异是多种疾病发展的有前景标志物,但现有基因分型方法繁琐、复杂且需昂贵仪器和复杂数据分析,难以满足即时检测需求。本文提出一种快速准确的生物传感器(T-ARMS-PCR-LFA),将四引物扩增性突变系统聚合酶链反应(T-ARMS-PCR)与 GoldMag 侧流层析试纸条(LFA)相结合,用于血管紧张素转换酶...
基因组编辑技术借助人工核酸酶可高效、精确修饰多种生物基因组,并广泛用于动物性状改良。本研究旨在建立一种快速、灵敏且可视化的方法,用于检测种系基因组编辑突变体中的小片段缺失。作者以 TALENs 系统构建的 MSTN 基因 2 bp 缺失和 11 bp 缺失基因编辑猪为材料,验证等位基因特异性 PCR(AS-PCR)与侧流层析核酸生物...
液体活检可微创、实时监测肿瘤基因组,是癌症诊断、预后和治疗决策的重要方法。癌症液体活检主要包括循环肿瘤细胞(CTC)和无细胞循环肿瘤DNA(ctDNA)分析。ctDNA是血液中无细胞DNA的肿瘤来源组分,通常依据癌症特异性突变检测;因其高度片段化和浓度极低,检测难度大。现有方法多耗时、复杂且昂贵。本文开发了一种基于金纳米颗粒(AuN...
血管紧张素转换酶(ACE)在血压调节和心血管稳态中发挥重要作用,其基因第16内含子存在287 bp插入/缺失(I/D)多态性,与心血管疾病风险及药物反应相关。本研究建立了一种基于金磁性纳米颗粒(GMNPs)侧流层析(LFA)的直接PCR快速基因分型方法。新鲜EDTA抗凝全血经NaOH裂解后无需DNA提取,直接进行双管等位基因特异性P...
神经坏死病毒(nodavirus)在全球水产养殖中引起大规模死亡,造成重大经济与环境损失。为疫苗研发和诊断应用提供快速、低成本手段,本研究开发并优化了一种双通道侧流纳米生物传感器,用于同时检测最常见的神经坏死病毒基因型 RGNNV 和 SJNNV。该传感器包含两个基于抗体的检测区,分别指示相应基因型,并设有一个质控区;阳性信号由抗生...
血栓形成是多基因/多因素疾病。最常见的三种遗传风险因素为凝血因子V基因G1691A突变(FV Leiden)、凝血酶原基因G20210A突变(FII)和亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变(MTHFR);其他相关标志物包括FV H1299R、MTHFR A1298C、FXIII V34L和PAI-1 4G/5G多态性。本文报道一种...
α-地中海贫血是一种常染色体隐性遗传病,主要表现为血红蛋白α链合成缺陷,主要由16号染色体上重复α珠蛋白基因缺失和/或非缺失核苷酸变异引起。明确携带者的α珠蛋白基因型有助于遗传咨询,并可用于Hb H疾病患者预后判断和治疗选择。本文报道一种可肉眼直接检测地中海和中东地区人群13种最常见非缺失α珠蛋白基因突变的方法。该方法包括:分别对H...
本研究开发了一种快速、低成本的三联生物传感器面板,用于血栓形成倾向最常见三种遗传风险因素的视觉基因分型,即凝血因子V Leiden(FV G1691A)、凝血酶原FII G20210A和MTHFR C677T单核苷酸突变。方法采用三重复PCR同时扩增三个目标片段,随后对每个位点进行5 min引物延伸反应进行等位基因判别。延伸产物通过...
DNA生物传感器通过特异性探针与目标序列杂交实现分子识别,并用电化学、光学或重力换能进行检测。近年来发展的一次性试纸条型传感器可在无仪器条件下视觉检测DNA。本文报道一种多分析物DNA生物传感器,用于两个单核苷酸多态性(SNP)的视觉基因分型。以同时检测两个SNP涉及的四个等位基因为模型,先PCR扩增包含两个多态位点的片段,再进行单...
近年来,面向小型实验室和现场检测的快速、简便、低成本 DNA 检测生物传感器受到持续关注。本文报道了一种一次性试纸条型 DNA 生物传感器,采用寡核苷酸修饰的彩色聚苯乙烯微球作为报告物,可在无仪器条件下实现 DNA 序列的目视检测。该传感器用于检测同时含有生物素基团和能与蓝色或红色微球表面寡核苷酸互补配对的 DNA 分子;杂交复合物...
已知单核苷酸多态性(SNP)基因分型多基于等位基因特异性探针杂交、寡核苷酸连接反应(OLR)、引物延伸或侵入性切割。OLR 因涉及两个识别事件而具有更高特异性:等位基因特异性探针与通用探针在靶 DNA 相邻位点杂交,连接酶仅在完全互补时连接。连接产物可用比色、时间分辨荧光、化学发光、电泳、微阵列、微球或均相荧光/比色法检测。本文开发...