Click chemistry functionalization of self-assembling peptide hydrogels.
自组装肽（SAP）水凝胶可为细胞提供纤维状微环境，并允许调控生化与机械信号。以往生化信号需在水凝胶组装前物理混合或在肽合成时引入，灵活性受限且成本较高。为克服这些限制，作者开发了“Click SAP”平台，通过在 KFE 肽序列中引入修饰赖氨酸（lysine-alloc），利用硫醇-烯点击化学将含硫醇分子共价连接到 SAP 水凝胶网...
Gelatinase Biosensor Reports Cellular Remodeling During Epileptogenesis.
癫痫发生是将健康脑转变为癫痫脑的渐进过程，可由脑损伤、肿瘤、感染和癫痫持续状态等触发，导致异常突触可塑性、神经炎症和细胞死亡。基质金属蛋白酶（MMPs）通过重塑细胞外基质（ECM）参与细胞可塑性，明胶酶（MMP-2和MMP-9）是癫痫发生的关键分子。本研究构建了用于在癫痫发生模型中原位报告明胶酶活性的生物传感器。该传感器由明胶酶敏感...
Genetically encoded FRET-based biosensor for imaging MMP-9 activity.
本研究开发了一种基因编码的Förster共振能量转移（FRET）生物传感器，用于连续监测基质金属蛋白酶9（MMP-9）的蛋白水解活性。MMP-9是一种胞外分泌型内肽酶，在发育、学习与记忆、癌症转移和卒中等过程中发挥重要作用。要评估该蛋白酶的功能，必须精确测定其活性动力学和亚细胞定位。该传感器无毒，并通过血小板源性生长因子受体跨膜域锚...
Genetically encoded fluorescent biosensors for live-cell imaging of MT1-MMP protease activity.
膜型1基质金属蛋白酶（MT1-MMP）的蛋白水解活性在癌细胞侵袭和转移中起关键作用。为在活癌细胞细胞外质膜表面以高时空分辨率可视化 MT1-MMP 活性，作者开发了一种基因编码荧光生物传感器。该传感器由增强型青色荧光蛋白（ECFP）和黄色荧光蛋白变体（YPet）通过 MT1-MMP 特异性底物肽 CPKESC NL FVLKD 连接...
Direct measurement of matrix metalloproteinase activity in 3D cellular microenvironments using a fluorogenic peptide substrate.
将可降解基团引入合成水凝胶，可显著提高其在体外三维细胞培养和组织工程中的应用价值。常用策略是引入对基质金属蛋白酶（MMPs）敏感的可切割寡肽，使细胞能够重塑和迁移于材料中。然而，MMP家族成员超过20种，其活性受多种生化与生物物理线索在时空上调控，因此仅用重组酶在溶液中表征可降解肽的切割，难以直接反映三维细胞介导的基质重塑。为此，作...
Quantitative FRET imaging to visualize the invasiveness of live breast cancer cells.
基质金属蛋白酶（MMPs）可重塑肿瘤微环境并促进癌症转移。其中，膜型1基质金属蛋白酶（MT1-MMP，MMP-14）具有促肿瘤和促转移作用，其蛋白水解活性是侵袭性肿瘤的重要可靶向生物标志物。本研究系统开发并表征了多种基于荧光共振能量转移（FRET）的高灵敏、高特异生物传感器，用于在活细胞中可视化MT1-MMP活性。经优化，AHLR-...
Direct visualization of protease activity on cells migrating in three-dimensions.
确定蛋白酶在细胞迁移和侵袭中的具体作用，需要在活细胞穿过细胞外基质时对其蛋白酶活性位点进行高分辨率成像。作者设计了一种新型荧光生物传感器，用于检测细胞外局部蛋白酶活性，并检验基质金属蛋白酶（MMP）功能在细胞迁移和侵袭三维胶原基质中的必要性。该探针含有间质胶原中的肽切割位点，可被 MMP-2、MMP-9 和 MMP-14（MT1-M...
Visualization of polarized membrane type 1 matrix metalloproteinase activity in live cells by fluorescence resonance energy transfer imaging.
膜型1基质金属蛋白酶（MT1-MMP）通过蛋白水解重塑细胞外基质，在癌细胞生物学中发挥关键作用。本研究利用荧光共振能量转移（FRET）成像技术开发了一种新型生物传感器，其传感元件锚定于细胞膜细胞外表面，可在活细胞中以亚细胞分辨率动态可视化 MT1-MMP 活性。表皮生长因子（EGF）在表达 MT1-MMP 的癌细胞中诱导显著 FRE...