在乳腺癌转移过程中，癌细胞侵袭依赖于富含肌动蛋白的突起结构侵袭足，其通过降解细胞外基质推动侵袭级联。本研究证明，Cdc42亚家族p21小G蛋白TC10调控侵袭足处膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）驱动的基质降解。TC10对于MT1-MMP在侵袭足细胞膜表面的暴露是必需的。作者利用所构建的Förster共振能量转移（FRET）生...
监测细胞表面酶活性具有挑战性，因为基于荧光共振能量转移（FRET）的生物传感器在转运和膜整合方面效率较低。为此，作者开发了一种供体与受体分离、可在原位组装的混合生物传感器。通过整合定向进化与序列-功能分析，作者工程化了一种 monobody 变体 PEbody，使其能够特异性结合藻红蛋白 R-PE。PEbody 可用于可视化细胞间连...
膜型1基质金属蛋白酶（MT1-MMP）的蛋白水解活性在癌细胞侵袭和转移中起关键作用。为在活癌细胞细胞外质膜表面以高时空分辨率可视化 MT1-MMP 活性，作者开发了一种基因编码荧光生物传感器。该传感器由增强型青色荧光蛋白（ECFP）和黄色荧光蛋白变体（YPet）通过 MT1-MMP 特异性底物肽 CPKESC NL FVLKD 连接...
基质金属蛋白酶（MMPs）可重塑肿瘤微环境并促进癌症转移。其中，膜型1基质金属蛋白酶（MT1-MMP，MMP-14）具有促肿瘤和促转移作用，其蛋白水解活性是侵袭性肿瘤的重要可靶向生物标志物。本研究系统开发并表征了多种基于荧光共振能量转移（FRET）的高灵敏、高特异生物传感器，用于在活细胞中可视化MT1-MMP活性。经优化，AHLR-...
膜型1基质金属蛋白酶（MT1-MMP）是一种膜锚定胶原酶，主要参与细胞外基质蛋白的机械降解，并在多种癌症中上调，其迁移与侵袭中的协调功能仍不清楚。本文利用一种特异性识别MT1-MMP的细胞内Förster共振能量转移（FRET）生物传感器，对侵袭性HT-1080活细胞进行成像。该传感器由MT1-MMP特异性底物与mOrange2和m...
侵袭性肿瘤细胞依赖细胞周围蛋白水解突破细胞外基质和基底膜屏障，膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）是癌细胞表面蛋白水解事件的主要介质。MT1-MMP 以酶原形式合成，其 N 端抑制性前结构域维持潜伏状态；分泌途径中 furin 切割 R108RKR1112Y112 位点，但完整前结构域仍非共价抑制新生酶。作者构建含 MT1-MM...
荧光寿命分辨成像显微镜（FLIM）已被用于监测蛋白水解酶膜型1基质金属蛋白酶（MT1-MMP）的酶活性，该酶参与细胞外基质蛋白降解及细胞迁移等过程，其表达升高与肿瘤细胞侵袭潜能正相关。本文利用一种基于 Förster 共振能量转移（FRET）的基因编码生物传感器，在体外及活 HeLa 和 HT1080 细胞中检测 MT1-MMP 的...
Src激酶和膜型1基质金属蛋白酶（MT1-MMP）在肿瘤侵袭与转移中均起关键作用，但二者在致癌性表皮生长因子（EGF）刺激下如何时空协调尚不清楚。本研究将两对光谱不同的荧光共振能量转移（FRET）对——CFP/YFP与mOrange2/mCherry——组合，在单个活细胞中同时可视化Src和MT1-MMP活性。作者先在体外和哺乳动物...
CD44 与膜型基质金属蛋白酶 MT1-MMP 在肿瘤细胞中协同促进侵袭，但机制不清。作者在含透明质酸（HA）的三维胶原 I（3D HA-Col I）基质中，利用活细胞时间序列共聚焦显微镜研究二者相互作用。荧光共振能量转移（FRET）显微成像显示，CD44 与 MT1-MMP 的相互作用优先发生在侵袭肿瘤细胞的后缘回缩部位以及侵袭过...
膜型1基质金属蛋白酶（MT1-MMP）通过蛋白水解重塑细胞外基质，在癌细胞生物学中发挥关键作用。本研究利用荧光共振能量转移（FRET）成像技术开发了一种新型生物传感器，其传感元件锚定于细胞膜细胞外表面，可在活细胞中以亚细胞分辨率动态可视化 MT1-MMP 活性。表皮生长因子（EGF）在表达 MT1-MMP 的癌细胞中诱导显著 FRE...