胰蛋白酶是消化系统中关键的蛋白酶，其异常水平与急性胰腺炎、囊性纤维化和胰腺癌等胰腺疾病相关。本文利用辅酶介导的电接枝含铁氰基聚合物作为新型信号放大策略，报道了一种基于切割的“信号开启”型电化学生物传感器，用于高选择性地检测极低水平的胰蛋白酶活性。传感器构建包括：将无游离羧基的肽底物经N端固定于电极表面；胰蛋白酶特异性切割肽底物；通过...
本文提出一种基于肽修饰电极的无标记电化学生物传感器，用于监测蛋白激酶A（PKA）活性及其抑制。传感器以半胱氨酸-肯肽（cys-kemptide, CLRRASLG）为底物肽，通过半胱氨酸残基末端巯基在金电极表面自组装固定。当PKA与三磷酸腺苷（ATP）共同作用于固定有cys-kemptide的金电极时，PKA催化ATP末端磷酸基团转...
本文开发了一种无标记电化学方法，用于灵敏测定介导 DNA 去甲基化的十-十一易位蛋白 1（TET1）。该策略主要基于 MspI 介导的限制性内切酶反应。生物传感器在 MspI 切割前后的电流响应差异依赖于 TET1 的活性和浓度。借助金纳米粒子，该方法在 0.0042–0.0210 mg/mL 范围内具有良好的线性，相关系数为 0....
本文报道了一种基于二硫化钼纳米片负载金纳米颗粒（MoS2-AuNPs）的电化学DNA（E-DNA）传感器，用于T4多聚核苷酸激酶（PNK）活性的“信号增强”一步检测及抑制剂筛选。该传感器将可切换双链DNA探针固定于MoS2-AuNPs修饰的玻璃碳电极上，利用PNK催化ATP将5′-羟基底物DNA磷酸化，随后λ外切酶识别并切割磷酸化链...
胰蛋白酶是重要的蛋白酶，可作为胰腺炎等病理状态诊断的可靠生物标志物。本文报道一种基于电化学控制聚合物接枝放大策略的新型 signal-on 电化学生物传感器，用于超灵敏检测胰蛋白酶活性。无羧基肽底物 CGGSSRGG-CONH2 先通过 N 端固定于金电极；胰蛋白酶切割肽底物后，在截短肽 C 端产生游离羧基，并通过羧基-Zr(IV)...
组蛋白乙酰转移酶（HAT）活性异常会导致多种细胞疾病。本文首次报道一种辅酶A（CoA）适配体辅助的无标记电化学剥离生物传感器，通过方波伏安法（SWV）灵敏检测HAT活性。HAT存在时，可将乙酰辅酶A（Ac-CoA）中的乙酰基转移至底物肽的赖氨酸残基，生成CoA分子。随后，CoA作为引发剂，通过典型靶标-适配体相互作用捕获其适配体，进...
蛋白激酶活性异常与糖尿病、心血管疾病、阿尔茨海默病和癌症等多种疾病相关，因此其活性检测对临床诊断和靶向治疗具有重要意义。本文报道了一种基于底物肽的电化学生物传感器，用于超灵敏检测蛋白激酶活性，并采用可逆加成-断裂链转移（RAFT）聚合作为信号放大策略。首先，Cys 末端底物肽通过 Au-S 自组装固定于金电极表面；在 ATP 存在下...
蛋白激酶（PKs）催化的蛋白磷酸化是肌肉收缩、细胞分化等信号转导与细胞调控过程的关键事件，PK 活性异常与心血管疾病、阿尔茨海默病、炎症及癌症密切相关，因此灵敏检测 PK 活性并筛选 PK 抑制剂对疾病诊断、药物发现和分子靶向治疗具有重要意义。本文报道了一种基于电化学控制可逆加成-断裂链转移（eRAFT）聚合的高灵敏电化学生物传感器...
本文构建了一种三重放大生物传感器，用于超灵敏检测DNA甲基转移酶（Dam MTase）活性并筛选抑制剂。该传感器以原位合成的银纳米团簇（AgNCs）作为信号探针，提供放大电流信号，并结合金纳米颗粒/电化学还原氧化石墨烯（AuNPs/ERGO）杂化材料和杂交链反应（HCR）放大策略。制备时，首先通过电化学共还原法在电极表面生成AuNP...
本研究构建了一种可重复使用的电化学生物传感器，用于α-葡萄糖苷酶（α-glucosidase）活性检测和抑制剂筛选。设计将ATP适配体拆分为Apt 1和Apt 2；Apt 2通过Au-S键自组装固定于金电极，并用MCH封闭以优化取向；Apt 1与4-氨基苯基-α-D-葡萄糖苷（pAPG）经EDC/NHS偶联修饰在谷胱甘肽（GSH）修...
本文报道了一种简便且超灵敏的酶生物燃料电池（EBFC）自供电生物传感策略，通过硫磷酸化介导的界面工程检测蛋白激酶A（PKA）活性及其抑制。该体系由GDH/CNT生物阳极和肽/AuNPs生物阴极组成。生物阴极上，肽CLRRASLG通过Au-S键固定于AuNPs/ITO电极，MCH封闭非特异性位点；在ATP-s存在下，PKA催化肽中丝氨...
构建了一种基于合成的L-半胱氨酸-银(I)配位聚合物（L-Cys-Ag(I) CP）的高灵敏电化学生物传感器，其形貌类似蛋白模拟纳米线，用于检测乙酰胆碱酯酶（AChE）活性并筛选其抑制剂。传感策略利用乙酰胆碱氯化物（ACh）在AChE催化下生成胆碱，胆碱再被胆碱氧化酶（ChOx）催化氧化产生过氧化氢（H2O2）；L-Cys-Ag(I...
本文建立了一种基于氧化石墨烯（GO）负载的末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）生成的富含胞嘧啶 DNA 纳米尾模板银纳米团簇（DNA-AgNCs）独特电催化活性的无标记电化学检测策略。TdT 可在无模板条件下催化脱氧胞苷三磷酸（dCTP）连接到单链 DNA（ssDNA）的 3′-OH 末端；随后在 Ag(I) 存在下，TdT 生成的富含 ...
本文报道了一种无标记且灵敏的电化学方法，用于检测柠檬酸合酶（CS）活性。该方法基于对由辅酶A（CoA）-Ag(I)重复单元形成的核酸模拟配位聚合物（CP）的详细研究。其检测机制为：CS可催化乙酰辅酶A（Ac-CoA）与草酰乙酸（OAA）之间的关键缩合反应，生成柠檬酸和CoA；在Ag(I)存在下，由于CoA巯基对Ag(I)的强配位能力...
DNA甲基转移酶（MTase）活性与癌症发生发展密切相关。本文报道一种基于DNA超结构的电化学方法，以M.SssI为例实现DNA甲基转移酶活性的信号放大检测。首先，在金电极表面固定巯基己醇（MCH），形成低密度自组装层，再固定硫醇化DNA双链。无DNA超结构时，该双链可被BstUI限制性内切酶切割；当M.SssI催化CpG甲基化后，...
DNA甲基转移酶（MTase）催化DNA甲基化，与癌症和细菌疾病密切相关，其活性检测及抑制剂筛选对疾病诊断和药物研发具有重要意义。本文报道了一种基于Dpn I消化触发多聚腺苷酸（polyA）DNA与金纳米颗粒修饰玻璃碳电极（AuNPs/GCE）结合的电化学策略，用于DNA MTase和抑制剂的简便高效检测。该方法仅使用一条亚甲基蓝（...
监测蛋白激酶活性和筛选抑制剂对激酶相关药物发现、疾病早期诊断及疗效评价具有重要意义。本文开发了一种基于羧肽酶Y（CPY）消化触发信号放大的简单电化学方法，用于检测酪蛋白激酶II（CK2）活性。在该策略中，CK2催化底物肽发生磷酸化，磷酸化位点保护底物肽免受CPY从C端水解，使电极表面保留带负电的肽片段，从而维持对氧化还原探针Fe(C...
本文报道一种创新安培生物传感器，用于体外测定大肠杆菌转酮醇酶（transketolase from Escherichia coli, TKec）活性，使用商品化 TK 底物：D-果糖-6-磷酸（D-F6P，生理供体）和乙二醛（glycolaldehyde, GA，最佳非磷酸化受体）。基于将半乳糖氧化酶（galactose oxid...
端粒酶是重要的肿瘤生物标志物，在超过85%的人类肿瘤中过表达，可用于早期癌症诊断和治疗靶点研究。本文报道了一种基于结构转换DNA探针的电化学生物传感器，用于灵敏检测端粒酶活性。该传感器以金电极为基底，将巯基修饰探针S1自组装固定于电极表面，S1包含端粒酶引物序列、识别区和胸腺嘧啶间隔序列；二茂苯（Fc）标记探针S2与S1杂交，使Fc...
本文报道了一种基于石墨烯修饰玻璃碳电极（G/GCE）的简单、超灵敏、无标记电化学方法，用于评价蛋白酪氨酸激酶（PTK）活性及其抑制。石墨烯可通过电催化氧化反应增强酪氨酸（Tyr）残基的电化学响应；激酶催化磷酸化后，磷酸化酪氨酸（pTyr）呈电不活性，使 Tyr 氧化电流降低。因此，肽中 Tyr 残基的电化学信号可作为内源信号报告物，...