Advanced Bioluminescence Reporter with Engineered
Gaussia 荧光素酶（GLuc）是一种广泛使用的分泌型荧光素酶报告蛋白，常用于细胞报告实验。本研究基于多种桡足类荧光素酶序列比对，采用序列引导突变策略，鉴定出可显著增强生物发光（BL）强度的关键氨基酸。在大肠杆菌中表达的突变蛋白中，M60L、K88Q、F89Y、I90L 和 S103T 五个单点突变在 coelenterazin...
Characterizing a New Fluorescent Protein for a Low Limit of Detection Sensing in the Cell-Free System.
基于无细胞蛋白合成（CFPS）的生物传感器具有高精度、低成本优势，但生物标志物在多种生物样本中常处于低浓度，因此需扩大动态范围并降低检出限，同时避免高背景。以往提高动态范围多依赖放大分析物输入信号，可能引入假阳性。本研究旨在提高 CFPS 系统的蛋白合成能力和报告蛋白输出信号，以实现更低 LOD。作者引入新型荧光蛋白 mNeonGr...
Microbial whole-cell biosensors: Current applications, challenges, and future perspectives.
微生物全细胞生物传感器（MWCBs）利用工程化微生物在目标分析物存在时产生或抑制报告蛋白表达，通过报告蛋白产生的可量化信号测定样品中生物可利用分析物水平，其成本通常低于常规分析仪器，并具备稳健、可微型化、高通量和多联检测潜力。本文系统综述 MWCB 的工作原理，区分微生物表面展示传感器与全细胞传感器，介绍组成型与诱导型表达系统，以及...
10.3389/fphar.2019.01166
生物传感器利用酶、抗体和核酸等生物组分高选择性地识别目标分析物，并将识别事件转换为可读信号。基因表达过程具有级联放大特性，可作为生物换能机制产生检测信号。近年来，高产量且低成本的无细胞蛋白合成（CFPS）系统使研究者能够直接利用从细胞中提取的转录与翻译机器，在均相反应体系中快速合成报告蛋白或报告RNA，从而构建无需活细胞、操作简便且...
A highly efficient pipeline for protein expression in Leishmania tarentolae using infrared fluorescence protein as marker.
莱什曼原虫（Leishmania tarentolae）是新型真核重组蛋白表达宿主，但现有筛选高表达克隆的流程耗时长、操作繁琐。本研究建立了一种以工程化红外荧光蛋白（IFP）为报告蛋白的高效蛋白表达流程。IFP 及其与拟南芥蛋白 ANAC42、ARR1 和 TPK1 的融合蛋白在莱什曼原虫中表达后，可在细胞内通过去卷积显微镜快速检测...
Development of bacteria-based bioassays for arsenic detection in natural waters.
天然水体中砷污染是全球性问题，大量人口饮用水中砷浓度可能超标。传统检测技术如原子吸收、原子荧光、电感耦合等离子体及高压液相色谱虽然准确，但成本高、耗时长，且难以满足现场快速检测需求。本文综述了基于细菌的生物检测法作为检测地下水和天然水中砷的新兴方法。其核心是基因改造的细菌传感器-报告菌株，如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和红...
Mutational optimization of the coelenterazine-dependent luciferase from Renilla.
Renilla 荧光素酶（RLUC）是基因表达和生物传感器应用中常用的报告酶，但其稳定性较差，催化机制尚未完全阐明。作者通过底物滴定发现，一个 RLUC 分子可催化约 100 个海肾素（coelenterazine）底物分子。活性位点 Pro220 突变延长了光子发射半衰期，使大肠杆菌中的发光更强。随机突变筛选发现两个新突变，可在体...