有丝分裂中染色体准确分离依赖染色体-纺锤体互作错误校正和纺锤体组装检查点（SAC）。激酶 MPS1 是这两个过程的关键调节因子，确保后期启动前染色体双定向。为解析 MPS1 激活的时间、空间及其调控，作者开发了高敏感、高特异的 FRET 生物传感器 MPS1sen。通过将 MPS1sen 分别锚定到动粒、着丝粒和染色质，研究发现 M...
有丝分裂期 DNA 双链断裂（DSB）会产生缺乏着丝粒的断裂染色体，若断裂片段错误分离将导致基因组不稳定。我们此前发现断裂染色体可通过 BubR1 依赖的“tether”将两个断裂端连接并忠实传递，但 BubR1 在断裂染色体上的招募与功能机制尚不清楚。本文表明，BubR1 必须与 Bub3 相互作用才能定位到 I-CreI 或激光...
Polo-like kinase 1（Plk1）是控制有丝分裂和细胞分裂的关键激酶。Plk1 在 S 期首先被招募到中心体，在 G2 晚期出现在动粒上，并在有丝分裂末期转位至中央纺锤体。Plk1 的激活需要 Aurora A 对其 T210 位点进行磷酸化，该过程依赖共因子 Bora。然而，关于 Plk1 最初在何处被激活存在争议：...
蛋白激酶A（PKA）调控细胞周期等多种细胞过程。本研究利用遗传编码的FRET生物传感器，基于AKAR衍生的AKAREV探针，在活HeLa细胞中以单细胞水平表征有丝分裂过程中PKA活性。结果显示，HeLa细胞进入中期后PKA活性显著升高，并维持至胞质分裂/末期结束。采用AKAREV T>A失活突变体和H89抑制剂验证了所测PKA活性的...
在有丝分裂纺锤体组装过程中，Aurora B 激酶参与纠错机制，使承受较低机械张力的动粒-微管连接解离。然而进入后期后，姐妹染色单体凝聚蛋白被移除导致张力下降，动粒-微管连接仍须维持。与此一致，Aurora B 在中期-后期转换时从染色体重新定位到中央纺锤体。本研究利用磷酸化 FRET 生物传感器进行 RNA 干扰筛选，鉴定出两个 ...
cyclin B–Cdk1 激酶是大多数真核细胞进入有丝分裂的触发因子。在动物细胞中，cyclin B 在间期于细胞核与细胞质间穿梭，并在前期迅速富集于细胞核，促进核纤层解聚和核膜崩解（NEBD）。目前 cyclin B1 核内积累的直接触发机制尚不清楚，传统观点认为 Plk1 激酶通过磷酸化抑制其核输出。本研究利用一种特异性检测 ...
RCC1是Ran GTP酶唯一已知的鸟苷酸交换因子，在核质运输、纺锤体组装和核膜重建中发挥关键作用。RCC1通过DNA与组蛋白的双模式结合染色质，结合缺陷会导致染色体错误分离；apo-Ran可增强其染色质结合，但机制不清。本文证明RCC1 N端1–20氨基酸尾对DNA结合必不可少，却抑制组蛋白结合；apo-Ran显著促进RCC1与D...