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Coupling a Live Cell Directed Evolution Assay with Coevolutionary Landscapes to Engineer an Improved Fluorescent Rhodopsin Chloride Sensor.

ACS synthetic biology 2022 Chi H, Zhou Q, Tutol JN, Phelps SM 等 8 人

荧光蛋白传感器在活细胞中的应用加速了对生物氯离子过程的理解。利用实验室引导进化可生成并多样化具有不同性质的传感器。我们此前发现,来自 Gloeobacter violaceus 的荧光质子泵视紫红质 wtGR 可改造为氯离子荧光传感器:在 wtGR 与青色荧光蛋白(CFP)融合体的席夫碱反离子位点引入 D121V 突变,得到 GR1...

Simultaneous intracellular chloride and pH measurements using a GFP-based sensor.

Nature methods 2010 Arosio D, Ricci F, Marchetti L, Gualdani R 等 6 人

氯离子是生物体中最丰富的阴离子,参与膜电位、神经传递、细胞体积和电荷平衡等生理过程,其稳态异常与多种疾病相关。传统荧光染料易从细胞泄漏且常需紫外激发,YFP 基氯传感器又受 pH 强烈影响,FRET 信号解释复杂。本文开发了一种非 FRET 比率型荧光生物传感器 ClopHensor,由氯敏感的 EGFP 变体 E2GFP 与氯和 ...

Monitoring of chloride and activity of glycine receptor channels using genetically encoded fluorescent sensors.

Philosophical transactions. Series A, Mathematical, physical, and engineering sciences 2008 Mukhtarov M, Markova O, Real E, Jacob Y 等 6 人

基因编码探针已成为非侵入监测离子、蛋白分布及细胞组分迁移与形成的有力工具。本文报道两种分子探针的功能表达,用于非侵入荧光监测胞内氯离子浓度([Cl]i)和甘氨酸受体(GlyR)通道功能。第一种为近期开发的蓝荧光蛋白–黄荧光蛋白(CFP–YFP)融合探针 Cl-Sensor,对 Cl- 具有较高敏感性(Kapp≈30 mM)。作者通过...