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Developing a circularly permuted variant of Renilla luciferase as a bioluminescent sensor for measuring Caspase-9 activity in the cell-free and cell-based systems.

Biochemical and biophysical research communications 2018 Mokhtar-Ahmadabadi R, Madadi Z, Akbari-Birgani S, Grillon C 等 7 人

由生物分子和活细胞构成的生物传感器与全细胞生物传感器能够感知生物体系中的特定刺激,并将其转换为可测量信号。其中,基于荧光素酶的生物发光传感器在分子生物学和成像系统中应用广泛。本项目利用圆形排列策略设计并构建了一种用于检测和定量 Caspase-9 活性的荧光素酶生物传感器。光谱学结果表明,圆形排列导致该传感器结构发生改变。随后,研究...

Novel biosensor using split-luciferase for detecting vitamin D receptor ligands based on the interaction between vitamin D receptor and coactivator.

Biochemical and biophysical research communications 2018 Mano H, Takano M, Ikushiro S, Kittaka A 等 5 人

维生素D受体(VDR)配体,如1α,25-二羟基维生素D3 [1α,25(OH)2D3]及其类似物,因在I型佝偻病、骨质疏松、银屑病、白血病和癌症等疾病治疗中的潜在临床应用而受到研究。此前,我们报道了一种基于分裂荧光素酶的生物传感器,可在短时间内检测VDR配体并评估其与VDR配体结合域(LBD)的亲和力。然而,若要检测血浆中1α,2...

Novel split luciferase-based biosensors for evaluation of vitamin D receptor ligands and their application to estimate CYP27B1 activity in living cells.

The Journal of steroid biochemistry and molecular biology 2018 Mano H, Ikushiro S, Sakaki T

本研究报道了一种基于分裂荧光素酶的新型生物发光传感器,用于在体内外评价维生素D受体(VDR)配体。此前构建的 LucN-LBD-LucC 传感器由萤火虫荧光素酶 N 端片段(LucN)、VDR 配体结合域(LBD)和 C 端片段(LucC)融合而成,VDR 配体结合后荧光素酶光强下降,虽可快速检测但灵敏度不足。为此,作者将参与 LB...

Development of a highly sensitive in vitro system to detect and discriminate between vitamin D receptor agonists and antagonists based on split-luciferase technique.

The Journal of steroid biochemistry and molecular biology 2018 Mano H, Ikushiro S, Saito N, Kittaka A 等 5 人

分裂荧光素酶技术广泛用于检测蛋白-蛋白相互作用及激素、维生素等生物活性小分子。作者此前在COS-7细胞中成功表达荧光素酶与维生素D受体(VDR)配体结合域(LBD)的嵌合蛋白LucC-LBD-LucN,命名为分裂荧光素酶维生素D生物传感器(SLDB),可在哺乳动物细胞中检测并区分VDR激动剂与拮抗剂。本研究建立了利用大肠杆菌表达SL...