Biochemistry
2016
Lea WA, O'Neil PT, Machen AJ, Naik S 等 13 人
通过外源配体结合稳定亚稳态或易聚集蛋白的折叠态,是降低蛋白折叠缺陷所致疾病病理的有吸引力策略。现有方法受蛋白聚集干扰而受限。本文报道一种基于 GroEL 分子伴侣的生物层干涉(BLI)变性剂脉冲平台,用于快速评估折叠蛋白的动力学稳定性并监测配体稳定效应,适用于内源稳定蛋白(单体、寡聚体、多结构域蛋白)和亚稳态蛋白(如低 Tm)。将目...
The FEBS journal
2016
Pastor A, Singh AK, Fisher MT, Chaudhuri TK
蛋白质折叠长期依赖溶液法,如溶解度、酶活、二级结构、FRET、NMR 和氢氘交换等,但快速分析常受聚集副反应影响。本文建立一种生物层干涉(BLI)分子伴侣检测系统,用于筛选变性蛋白的优良复性条件。通过监测无核苷酸高亲和 GroEL 与固定蛋白的结合,可实时反映固定蛋白随时间的折叠程度。GroEL 优先结合暴露疏水面的未折叠或部分折叠...
Biochemistry
2016
Pantoja-Uceda D, Neira JL, Saelices L, Robles-Rengel R 等 7 人
铵通过谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸合酶(GOGAT)的连续作用进入碳骨架。蓝细菌 Synechocystis sp. PCC 6803 的 GS I 活性受两个内在无序失活因子(IF)调控:65 残基 IF7 和 149 残基 IF17。本研究利用核磁共振(NMR)研究 IF7 与 IF17 的构象,并用 NMR 和生物层干涉(B...
Analytical biochemistry
2016
Mechaly A, Cohen H, Cohen O, Mazor O
生物层干涉(BLI)是一种利用光纤生物传感器对蛋白相互作用进行无标记实时监测的光学技术。本研究将Octet Red BLI系统的自动化、无微流控和在线监测优势与信号增强步骤相结合,建立了一种快速、高灵敏的免疫学检测方法,用于生物战剂检测。作为概念验证,作者选择两类生物威胁对象:蛋白毒素蓖麻毒素(ricin)和革兰阴性菌土拉弗朗西斯菌...
Journal of biomolecular screening
2016
Yu Y, Mitchell S, Lynaugh H, Brown M 等 13 人
实时无标记抗体筛选系统因抗体发现平台产生大量纯化抗体和上清样品而日益重要,但生物传感器类型会显著影响动力学和表位分箱结果。本研究评估了ForteBio人源特异性Protein A(ProA)、抗人IgG定量(AHQ)、抗人Fc捕获(AHC)以及定制生物素化抗人Fc捕获(b-AHFc)传感器在纯化IgG和IgG上清中的装载能力、再生性...