Competitive Epitope Binning Using HT-SPR.
本文介绍基于高通量表面等离子共振(HT-SPR)的竞争表位分箱方法,用于系统解析多达数百个单克隆抗体(mAbs)的竞争表位谱。该方法在 Carterra LSA/LSAXT 仪器上,将纯化 mAb 通过 EDC/sulfo-NHS 胺基偶联固定于 HC30M 生物传感器芯片,形成 mAb 阵列;随后依次注入可溶性抗原(Ag)和溶液相...
本文介绍基于高通量表面等离子共振(HT-SPR)的竞争表位分箱方法,用于系统解析多达数百个单克隆抗体(mAbs)的竞争表位谱。该方法在 Carterra LSA/LSAXT 仪器上,将纯化 mAb 通过 EDC/sulfo-NHS 胺基偶联固定于 HC30M 生物传感器芯片,形成 mAb 阵列;随后依次注入可溶性抗原(Ag)和溶液相...
光致变色适配体开关检测(PHASA)是一种新发展的荧光生物传感平台,结合适配体适应性结合与苯乙烯光异构化动力学。该方法将合适的苯乙烯-配体-适配体复合物转化为可逆生物传感器,其性能取决于结合亲和力、适配体浓度和苯乙烯分子结构。因此,苯乙烯-配体共轭物的构效关系对预测和优化传感器灵敏度至关重要。本文提出并讨论了用于计算 PHASA 检...
本文利用石英晶体微天平(QCM)方法评估糖苷键中硫原子对蛋白识别的影响。作者发展了α1-2和α1-6连接的O-与S-二甘露糖的合成路线,并以甘露糖功能化QCM传感器为平台,在自动流动系统中开展与刀豆蛋白A(Con A)的竞争结合实验。传感器表面通过光引发亚硝基介导偶联、炔基聚乙二醇连接臂及铜催化叠氮-炔环加成(CuAAC)固定α-D...
随着糖尿病相关医疗成本上升,基于糖化血红蛋白A1c(HbA1c)这一长期血糖生物标志物的生物传感检测成为血糖监测的重要挑战。在面向即时检测(POC)的HbA1c生物传感器开发中,构建对HbA1c具有高反应产率和特异性的生物识别层是关键。为此,作者将硼酸功能化水凝胶与玻璃纤维膜整合,开发新型HbA1c生物传感界面材料。以N-羟乙基丙烯...
我们建立了一种用于缓冲液中蛋白质检测的免疫传感平台。该平台利用抗体偶联氧化石墨烯(GO)纳米片为分析物蛋白提供定量结合位点。当分析物蛋白与荧光素标记的标准蛋白竞争结合位点时,GO 对结合在其表面的荧光素标记蛋白产生定量荧光猝灭,猝灭程度由分析物蛋白浓度决定。因此,溶液中未猝灭荧光素标记蛋白的荧光强度随分析物蛋白浓度升高而增加。与传统...
基于刀豆蛋白A(ConA)的竞争结合检测在连续血糖监测中具有重要潜力,但传统荧光配体因携带多个低亲和基团,易与多价 ConA 发生广泛交联和聚集,导致检测不可逆且稳定性不足。本文设计并合成了一种新型荧光配体 APTS-MT,其携带单个高亲和三甘露糖基团,可被 ConA 完整结合位点识别,同时连接一个荧光团,用于通过荧光各向异性追踪配...
为实现血糖连续监测,作者开发了一种植入式无标记光学传感器:将光纤探针置于注射器针头内部空腔中,并在探针尖端固定葡萄糖结合蛋白刀豆蛋白A(Concanavalin A, Con A);针内加载化学偶联甘露糖的牛血清白蛋白(BSA-mannose)溶液,并用半透膜封闭。当传感器浸入葡萄糖样品时,葡萄糖小分子可自由透过半透膜,与针腔内的 ...
高通量蛋白质组学技术不断揭示蛋白互作网络,但同一靶蛋白同时结合多个配体时,如何准确判断多蛋白复合物能否组装以及不同配体是否竞争同一结合位点,仍是重要挑战。ABRF-MIRG 开展了一项以生物传感器技术为核心的基准研究,评估各实验室利用表面等离子共振(SPR)等技术正确描述两蛋白配体与靶蛋白相互作用的能力。参与者获得微克级三种未知蛋白...
我们开发了一种用于全人血糖尿病诊断的电化学糖化血红蛋白(HbA1c)生物传感器,其基于糖化蛋白之间的竞争性结合反应。迄今为止,尚无研究报道一种简单且准确的电化学生物传感器用于全血中 HbA1c 的定量,因为在全血中很难将 HbA1c 与大量血红蛋白及其他成分正确区分。为检测糖化血红蛋白,我们使用硼酸修饰电极,其硼酸基团可与糖化蛋白糖...
人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)是中性粒细胞释放的主要丝氨酸蛋白酶,其异常活性与类风湿关节炎、慢性阻塞性肺疾病、成人呼吸窘迫综合征等疾病相关。本文报道一种基于竞争结合反应的均相荧光适配体传感器,用于检测 HNE。传感器由 HNE DNA 适配体、短 DNA 乱序序列 SS 和分子信标 MB 组成;MB 5'端标记荧光素,3'端标记 ...