志贺氏菌是引起细菌性痢疾的主要病原体，其中志贺氏菌 S. sonnei 在发达地区最常见，在未发达地区居第二位。本研究建立多重交叉置换扩增（MCDA）联合侧流层析生物传感器（LFB）方法，用于检测携带 ipaH 和 wbgX 基因的致病性 S. sonnei 菌株。多重 MCDA-LFB 在 63°C 恒温纯培养条件下，30 min...
由脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis）引起的脑膜炎球菌病仍是全球重大公共卫生问题，A、B、C和W135为主要致病血清群，及时检测并区分这些血清群至关重要。本研究建立了多重交叉置换扩增-侧流层析生物传感器（MCDA-LFB）检测体系，分别靶向ctrA、sacB、siaD、siaD和synG基因，用于检测脑膜炎奈...
本研究将逆转录重组酶聚合酶扩增（RT-RPA）分别与荧光检测平台和侧流生物传感器（LFB）结合，用于快速检测猪脑心肌炎病毒（EMCV）。针对EMCV 3D基因高保守区设计引物和探针，qRT-RPA与LFB RT-RPA最佳反应条件均为42 ℃、20 min。两种方法对EMCV具有高度特异性，与7种其他猪源病毒无交叉反应。以10倍系列...
伯克霍尔德菌（Burkholderia pseudomallei）是高致病性病原菌，可引起类鼻疽，在多个热带发展中国家构成重要公共卫生问题。本研究提出并验证了一种新型检测方法——多重交叉置换扩增联合纳米颗粒侧流生物传感器（MCDA-NB），用于鉴定伯克霍尔德菌并诊断类鼻疽。B. pseudomallei-MCDA 针对III型分泌系...
背景：结核病（TB）是由结核分枝杆菌复合群（MTBC）引起的严重慢性传染病，因此开发新型、简便、快速且灵敏的MTBC检测方法对结核病防治具有重要意义。结果：本研究建立了多重交叉置换扩增（MCDA）联合纳米颗粒侧流层析生物传感器（LFB）同时检测MTBC两个靶基因（IS6110和mpb64）的方法（MCDA-LFB）。针对IS6110...
热带念珠菌（Candida tropicalis）是日益重要的机会致病真菌，可引起危及生命的侵袭性念珠菌病。传统培养鉴定需3–7天，难以满足快速诊断需求。本研究建立多重交叉置换扩增（MCDA）联合纳米颗粒侧流层析生物传感器（LFB）检测热带念珠菌。MCDA体系设计10个引物靶向热带念珠菌ITS II基因，在等温扩增仪中扩增；扩增产物...
幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, H. pylori）的非侵入性检测在临床实践中具有重要意义，但现有方法多依赖昂贵设备或流程复杂，难以用于流行病学调查。本研究旨在建立一种基于CRISPR-Cas12a技术、可靠、快速且经济的非侵入性方法，用于粪便标本中H. pylori的检测。作者建立了新型CRISPR-Cas1...
针对SARS-CoV-2感染诊断需求，作者建立了逆转录多重交叉置换扩增（RT-MCDA）联合纳米颗粒生物传感器（BS）的COVID-19快速检测方法（RT-MCDA-BS）。该方法设计两套引物，分别靶向SARS-CoV-2的开放阅读框1a/b（F1ab）和核衣壳蛋白基因（N），在64℃恒温反应35 min，总流程可在1 h内完成，并...
扩增反应与电泳或实时荧光系统联用已成功用于核酸分析，但复杂步骤或昂贵仪器限制其在低资源环境中的应用。为克服这些不足，作者将链交换扩增（SEA）与侧流层析试纸条（LFA）集成，构建了一种通用且简单的检测平台。SEA 是一种简单的等温扩增反应，仅需一对引物和一种 DNA 聚合酶，且其短扩增产物易于在试纸条上迁移。LFA 试纸条可稳定保存...
粪肠球菌（Enterococcus faecalis）是常见机会性病原菌，可引起医院获得性感染，因此建立可靠、快速的检测方法对诊断和随访治疗具有重要意义。本研究建立了一种多重交叉置换扩增联合金纳米颗粒侧流生物传感器（MCDA-LFB）方法用于检测粪肠球菌。依据粪肠球菌特异性基因Ef0027设计10个特异性引物，优化MCDA扩增条件，...
结核分枝杆菌（MTB）仍是全球公共卫生重大威胁。本研究开发了一种多重交叉置换扩增结合纳米颗粒侧流生物传感器（MCDA-LFB）方法，用于同时检测参考菌株 H37Rv 和临床样本 DNA 中 MTB 的 IS6110 与 IS1081。扩增在固定温度 67°C 下 30 min 完成，整个流程包括快速模板制备 15 min、等温反应 ...
布鲁氏菌属可引起多种动物及人类布鲁氏菌病，人感染可危及生命。本研究采用新型等温扩增技术多重交叉置换扩增（MCDA）检测所有布鲁氏菌种。以布鲁氏菌种特异性基因Bscp31为靶标，设计一组10条引物，将MCDA与纳米颗粒侧流层析生物传感器（LFB）偶联，实现对布鲁氏菌特异性扩增产物的高特异、简便、快速和可视化检测。按该方案，MCDA扩增...
肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae, K. pneumoniae）是引起院内感染和暴发的重要病原菌。本研究建立了一种基于多重交叉置换扩增（multiple cross displacement amplification, MCDA）的K. pneumoniae快速检测方法，可在65°C等温扩增40 min内获...
本文报道了一种用于膀胱癌尿液microRNA即时检测的双等温级联策略与三叉形侧流肽核酸（PNA）生物传感器。尿液microRNA是稳定、非侵入的肿瘤生物标志物，但现有方法存在背景高、序列相似导致特异性不足以及绝对定量受限等问题。该系统由碱基堆叠杂交-指数等温扩增（BSH-EXPAR）、PNA探针和三叉形侧流PNA生物传感器（TLPB...