志贺氏菌是引起细菌性痢疾的主要病原体，其中志贺氏菌 S. sonnei 在发达地区最常见，在未发达地区居第二位。本研究建立多重交叉置换扩增（MCDA）联合侧流层析生物传感器（LFB）方法，用于检测携带 ipaH 和 wbgX 基因的致病性 S. sonnei 菌株。多重 MCDA-LFB 在 63°C 恒温纯培养条件下，30 min...
流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）是机会致病菌，常引起儿童菌血症、脑膜炎和肺炎。本文开发了一种基于多重交叉置换扩增（MCDA）和实时荧光技术的快速检测方法。研究设计了10条引物用于H. influenzae实时MCDA反应，并按实时MCDA原理将核心引物修饰上限制性内切酶识别序列、荧光基团和淬灭基团。反应在...
本研究开发基于杂交级联加链置换扩增（HyCaSD）的分子信标生物传感器，用于高效检测病毒RNA。HyCaSD发夹探针两端分别标记Cy5荧光基团和BHQ3淬灭基团；无靶标时探针保持发夹结构，荧光被淬灭；靶标RNA与探针环区特异性杂交后，发夹打开，荧光基团与淬灭基团分离，立即产生荧光信号。该方法无需后染色，避免核酸染料非特异结合造成的假...
由脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis）引起的脑膜炎球菌病仍是全球重大公共卫生问题，A、B、C和W135为主要致病血清群，及时检测并区分这些血清群至关重要。本研究建立了多重交叉置换扩增-侧流层析生物传感器（MCDA-LFB）检测体系，分别靶向ctrA、sacB、siaD、siaD和synG基因，用于检测脑膜炎奈...
本研究将逆转录重组酶聚合酶扩增（RT-RPA）分别与荧光检测平台和侧流生物传感器（LFB）结合，用于快速检测猪脑心肌炎病毒（EMCV）。针对EMCV 3D基因高保守区设计引物和探针，qRT-RPA与LFB RT-RPA最佳反应条件均为42 ℃、20 min。两种方法对EMCV具有高度特异性，与7种其他猪源病毒无交叉反应。以10倍系列...
适配体因特异性高、稳定性好、易于筛选和修饰，已成为生物传感器中重要的识别元件。微芯片作为新型分析检测平台，在生化传感、医学诊断和环境监测中快速发展。本文综述了适配体信号放大策略与微芯片结合的高灵敏生物分析应用，系统介绍微流控芯片、纸基芯片和微阵列芯片三类平台的特点。重点讨论酶介导放大（PCR、RCA、LAMP、SDA、NASBA、R...
新冠疫情凸显了快速、灵敏病原检测方法的迫切需求。本文提出 CASCADE（基于 CRISPR/Cas 的比色核酸检测）系统，用于快速、特异性地肉眼检测 SARS-CoV-2 RNA。该方法中，病毒 RNA 由 LwaCas13a 蛋白识别，识别后激活其副切割 RNase 活性，切割偶联在金纳米颗粒（AuNPs）表面的单链 RNA 寡...
在抗击2019冠状病毒病（COVID-19）全球大流行中，核酸检测亟需简便、快速、灵敏的工具。PCR是经典核酸检测方法，具有高灵敏度和特异性，但依赖热循环，需要昂贵设备、专业人员且周转时间长。目前，成簇规律间隔短回文重复序列（CRISPR）生物传感器已成为核酸检测的有力工具，并可在生理温度下运行，易于组装为即时检测设备。微流控芯片有...
伯克霍尔德菌（Burkholderia pseudomallei）是高致病性病原菌，可引起类鼻疽，在多个热带发展中国家构成重要公共卫生问题。本研究提出并验证了一种新型检测方法——多重交叉置换扩增联合纳米颗粒侧流生物传感器（MCDA-NB），用于鉴定伯克霍尔德菌并诊断类鼻疽。B. pseudomallei-MCDA 针对III型分泌系...
本文初步验证氧化石墨烯（GO）纳米片可增强重组酶聚合酶扩增（RPA）。GO 通过吸附 RPA 反应组分诱导局部聚集，提高扩增效率；重组酶先与引物结合形成核蛋白丝并被 GO 吸附，改变其结构。基于 GO 增强 RPA 构建了等温荧光“开启”生物传感器，用于检测 RNA 干扰（RNAi）转基因植物。FAM 标记引物被 GO 吸附并通过荧...