Engineering protein and DNA tools for creating DNA-dependent protein switches.
可开关蛋白能响应配体结合、pH、温度或光等输入，在失活（OFF）与激活（ON）构象间转换。CRISPR系统中的Cas核酸酶是典型例子，其活性由特定DNA或RNA序列结合调控。虽然Cas酶中寡核苷酸结合调控生物活性的机制复杂且高度特异，但蛋白工程与DNA工程的进展使这种控制模式可引入其他酶。本章重点介绍结合这两类工程手段构建生物传感器...
A nanoluciferase biosensor to investigate endogenous chemokine secretion and receptor binding.
分泌型趋化因子通过结合膜受体介导细胞通讯。本文报道了一种高灵敏度实时方法，用于在活细胞中定量天然趋化因子的分泌及其与受体的结合。作者利用 CRISPR/Cas9 基因编辑将纳米荧光素酶小片段 HiBiT 插入 CXCL12 基因 C 端，使细胞内源表达并分泌 CXCL12-HiBiT。随后通过化学发光输出监测和定量 CXCL12 的...