工程化蛋白生物传感器以高灵敏度响应特定生物分子并触发精确细胞反应，是诊断与合成细胞生物学的重要目标。以往设计多依赖结合结构明确分子；将柔性化合物识别与预期细胞响应耦合可拓展应用。本文提出一种计算策略，用于设计构象动态蛋白与肽之间的信号复合物。为验证方法，作者构建了超敏感趋化受体—肽对，可在原代人T细胞中引发强信号响应和显著趋化。与传...
分泌型趋化因子通过结合膜受体介导细胞通讯。本文报道了一种高灵敏度实时方法，用于在活细胞中定量天然趋化因子的分泌及其与受体的结合。作者利用 CRISPR/Cas9 基因编辑将纳米荧光素酶小片段 HiBiT 插入 CXCL12 基因 C 端，使细胞内源表达并分泌 CXCL12-HiBiT。随后通过化学发光输出监测和定量 CXCL12 的...
人巨细胞病毒（HCMV）是广泛存在的疱疹病毒科病原体，其大基因组编码多种非病毒复制必需但可操纵宿主免疫环境的基因。US27 基因编码一种与趋化因子受体家族 G 蛋白偶联受体（GPCR）同源的蛋白，虽无已知趋化因子配体，却可调节宿主受体 CXCR4 的信号活性。本研究利用新型荧光激活蛋白（FAP）生物传感器系统，探讨 US27 增强 ...
趋化因子及其受体参与多种生理与病理过程，其表达失调与慢性炎症、自身免疫病、免疫缺陷和肿瘤相关。趋化因子受体属于G蛋白偶联受体家族，是七次跨膜整合膜蛋白，通过GTP结合蛋白传递信号。研究这些受体结构、构象或激活机制的许多方法依赖配体结合测定，并常需标记趋化因子或受体，可能改变其结合特性。表面等离子共振（SPR）可在实时、无标记条件下分...
基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器是实时测量无标记分析物生物分子相互作用的成熟工具，因此适合评估G蛋白偶联受体（GPCR）结合相互作用。本研究以携带趋化因子受体CXCR4的慢病毒颗粒为载体，使CXCR4保持其天然质膜环境，利用该颗粒作为特异性受体，通过SPR监测CXCR4与其配体CXCL12的相互作用。该方法在5–40 nM范...
基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器是测量分子相互作用的成熟方法，但用于G蛋白偶联受体（GPCR）研究时通常受限于需将受体经去垢剂溶解后再重建到脂质环境中。本文以趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12为模型，提出一种高重复性的SPR生物传感器方法：利用慢病毒颗粒在出芽过程中携带细胞膜片段，将CXCR4以天然脂质膜环境展示于病...