A Modular Biosensor Design for Quantitative Measurement of Free Nedd8.
本研究旨在开发一种基因编码生物传感器，用于定量检测Nedd8。Nedd8是一种通过与其他蛋白共价结合调控细胞信号的后翻译修饰蛋白，游离Nedd8与结合态Nedd8平衡失调与多种疾病相关，但目前缺乏直接定量游离Nedd8的方法。作者提出模块化设计策略：以特异性结合靶蛋白的结合域为核心，在结合位点两侧分别连接两个报告域，使靶标结合与报告...
An immunoassay based on bioluminescent sensors for rapid detection of African swine fever virus antibodies.
血清学抗体检测对传染病诊断与控制具有重要意义。非洲猪瘟是家猪和野猪最严重的传染病，近年来严重威胁全球养猪业。本文开发了一种基于分裂荧光素酶系统的快速、简便、灵敏免疫分析方法，用于检测非洲猪瘟病毒（ASFV）特异性IgG抗体。在该方法中，ASFV的p30蛋白与纳米荧光素酶NanoLuc的LgBiT和SmBiT亚基进行基因偶联，作为融合...
Engineering protein and DNA tools for creating DNA-dependent protein switches.
可开关蛋白能响应配体结合、pH、温度或光等输入，在失活（OFF）与激活（ON）构象间转换。CRISPR系统中的Cas核酸酶是典型例子，其活性由特定DNA或RNA序列结合调控。虽然Cas酶中寡核苷酸结合调控生物活性的机制复杂且高度特异，但蛋白工程与DNA工程的进展使这种控制模式可引入其他酶。本章重点介绍结合这两类工程手段构建生物传感器...
A nanoluciferase biosensor to investigate endogenous chemokine secretion and receptor binding.
分泌型趋化因子通过结合膜受体介导细胞通讯。本文报道了一种高灵敏度实时方法，用于在活细胞中定量天然趋化因子的分泌及其与受体的结合。作者利用 CRISPR/Cas9 基因编辑将纳米荧光素酶小片段 HiBiT 插入 CXCL12 基因 C 端，使细胞内源表达并分泌 CXCL12-HiBiT。随后通过化学发光输出监测和定量 CXCL12 的...