Ras同源家族成员A（RhoA）是细胞骨架动态、分裂、迁移和黏附等过程中的信号枢纽。RhoA活性受到严格的时空控制，但其下游效应器是否共享相同的激活动态仍不清楚。本研究开发了一种新型单色FRET生物传感器，用于在活细胞中以高时空分辨率测量Rho相关激酶（ROCK）活性，并验证了Rho激酶活性报告器（RhoKAR）的性能。RhoKAR...
有机磷农药（OPs）的滥用会造成环境污染并威胁人体健康，亟需简单、高效且灵敏的检测方法。本文建立了一种基于二氧化锰纳米片（MnO2 nanosheets）信号增强的新型放大荧光偏振（FP）生物传感器，用于高灵敏检测OPs。在该体系中，OPs可高效抑制乙酰胆碱酯酶（AChE）活性，阻断乙酰硫代胆碱（ATCh）水解生成硫代胆碱（TCh）...
细胞外囊泡（EVs）是由所有细胞主动分泌的膜结合磷脂囊泡，携带亲代细胞特异性标记，可用于液体活检中识别特定细胞。为支持基于 EV 的临床诊断，快速可靠的 EV 计数方法至关重要。本文开发了一种基于荧光偏振（FP）检测亲脂性荧光素探针 5-十二酰氨基荧光素（C12-FAM）的 EV 快速、低成本定量方法。C12-FAM 的烷基尾可特异...
本研究将可识别四种来源脂多糖的80 nt广谱ssDNA适配体LA80进行截短，采用基于二级结构的茎环截短和删除固定引物区两种策略，获得LA27等截短适配体。LA27保留广谱识别能力，且对LPS的结合亲和力提高，Kd为46.2±9.5 nM，约为全长LA80（102±17 nM）的一半。作者建立以氧化石墨烯（GO）为信号增强剂的荧光偏...
银离子虽在抗菌、电子和生物传感等领域有应用，但也是环境污染物并危害人体健康，因此需要快速灵敏的检测方法。本文开发了一种基于巯基-DNA功能化金纳米颗粒（AuNPs）的荧光偏振传感器，用于水溶液中银离子（Ag+）的检测。该策略利用Ag+与DNA双链中胞嘧啶-胞嘧啶（C-C）错配位点特异性结合，形成稳定的金属介导胞嘧啶-Ag+-胞嘧啶（...
银离子（Ag+）对水生生物具有高度毒性，并可经食物链在人体内富集，因此需要灵敏、选择性定量检测痕量银离子的方法。本研究首次提出一种二氧化锰（MnO2）纳米片辅助、基于配体-DNA相互作用和荧光偏振（FP）的银离子检测方法。Ag+加入预先形成的丙啶（Proflavine, PF）-DNA复合物后，诱导PF释放，引起荧光偏振的弱变化；随...
开发高灵敏、高选择性检测超低浓度肿瘤标志物的方法对癌症疗效评估和早期临床诊断具有重要意义。本文利用TiS2纳米片作为荧光偏振（FP）增强剂，并采用Zn2+依赖的自水解脱氧核酶（DNAzyme）作为催化剂，建立了两种FP放大检测策略，用于生物分子检测。一种策略基于小分子连接DNA的末端保护：生物分子与DNA-小分子嵌合体中的小分子结合...
本文报道了一种基于二氧化硅纳米颗粒–DNA/银纳米团簇三明治结构增强荧光偏振效应的新型均相生物传感器，用于乙型肝炎病毒DNA（HBV DNA）的灵敏、选择性检测。该体系以50 nm SiO2 NPs为生物相容性载体，通过链霉亲和素与生物素的高亲和力相互作用固定5'端生物素标记的En-DNA探针；Ag-DNA探针形成DNA/Ag NC...
荧光偏振（FP）检测结合荧光标记适配体近年来备受关注，但小分子结合仅引起标记适配体分子量微小变化，使其难以用于小分子检测。为此，本文报道了一种用于高灵敏检测小分子的FP适配体检测方法，并引入新型信号放大策略。以腺苷为模型靶标，在无腺苷存在时，游离的FAM标记适配体可被核酸酶切割，FAM标记核苷酸片段从dT-生物素/链霉亲和素复合物中...
本文报道了一种基于荧光偏振（FP）的血栓素适配体生物传感器，采用链霉亲和素包覆的硅纳米颗粒（SNPs）作为增强探针。5'-生物素-GGTTGGTGTGGTTGG-3'血栓素适配体（biotin-TBA1）通过生物素-链霉亲和素特异性结合固定在SNPs表面。加入荧光素标记的血栓素适配体（FAM-TBA2）后，在血栓素存在下，TBA1和...
本文构建了一种基于DNAzyme自组装金纳米棒（AuNRs）的荧光共振能量转移（FRET）或荧光偏振（FP）方法，用于水溶液中Cu2+的超灵敏、选择性检测。该体系以3'-TAMRA标记的DNAzyme底物链（Sub）和酶链（Enz）为识别探针。无Cu2+时，Sub-Enz双链通过静电作用吸附于正电荷AuNRs表面，使TAMRA与Au...
本文报道了一种基于金纳米颗粒（AuNPs）荧光偏振增强效应和λ核酸酶（λ exo）切割反应的荧光偏振（FP）纳米传感器，用于检测T4多聚核苷酸激酶（T4 PNK）活性及其抑制。该传感器以3'端修饰AuNPs的DNA发夹探针为T4 PNK底物，在ATP存在下，T4 PNK将DNA 5'-羟基磷酸化，λ exo随即切割5'-磷酸化末端，...
本文报道一种可重复使用、高灵敏的荧光偏振（FP）生物传感器，用于罐装鱼中总汞（Hg2+）检测。以链霉亲和素修饰的超顺磁性氧化铁纳米颗粒（MNPs）为增强探针，将含胸腺嘧啶（T）的单链 DNA（ssDNA）通过生物素–链霉亲和素作用固定于 MNPs 表面；另一条 5′-FAM 标记的含 T ssDNA 作为荧光探针。Hg2+ 可特异性...
本文报道了一种基于靶标诱导适配体酶切保护的新型荧光偏振（FP）适配体传感平台。该方法通过荧光偏振分析磷酸二酯酶I（PDE I）介导的荧光标记适配体尺寸变化来检测小分子。首先以酪氨酰胺/抗酪氨酰胺DNA适配体体系作为模型建立概念验证。无靶标时，标记适配体被PDE I从3'端酶切为小DNA片段，荧光各向异性/偏振信号较低；酪氨酰胺结合后...