青色荧光蛋白（CFP）常作为遗传编码生物传感器中的FRET供体用于活细胞成像。近期通过大规模随机突变获得了量子产率显著提高的CFP变体。本文表明，仅在ECFP中引入T65S和H148G两个突变，即可使其性能接近最优CFP，得到Aquamarine（QY=0.89，平均荧光寿命tf=4.12 ns）。Aquamarine具有优异的pH...
基因编码钙指示剂已成为在活体复杂组织和神经回路中成像信号的重要工具，但由于其人工多模块组成，结构-功能关系往往不清楚。本文结合蛋白质工程与动力学、光谱及生物物理分析，系统表征基于 Förster 共振能量转移（FRET）的钙生物传感器 TN-XXL。通过工程化酪氨酸荧光光谱，作者发现四个钙结合 EF-hand 中 EF3-1 和 E...
免疫球蛋白E（IgE）介导过敏反应，其Fc区与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面高亲和受体FcεRI的结合是过敏致敏与细胞激活的关键步骤。为在溶液中监测人IgE Fc（IgEFc）的构象及其受体结合时的变化，作者构建了基于Förster共振能量转移（FRET）的荧光生物传感器，将增强绿色荧光蛋白（eGFP）和单体红色荧光蛋白（mRFP）分别...
本研究构建了一种用于葡萄糖检测的光学生物传感器，将葡萄糖氧化酶（GOD）包埋于整体二氧化硅溶胶-凝胶基质中，作为生物活性元件。利用时间相关单光子计数（TCSPC）时间分辨光谱，在可见光区研究自由和固定 GOD 在不同葡萄糖浓度下的内源荧光。GOD 中的黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）在酶促反应中发生氧化还原变化，其荧光衰减可用三指数模型...
本文报道了对一种生物合成融合蛋白 CFP–GBP–YFP 光学性质的系统表征。该蛋白由青色荧光蛋白（CFP）、葡萄糖结合蛋白（GBP）和黄色荧光蛋白（YFP）融合而成，其中 CFP 和 YFP 分别作为分子内荧光共振能量转移（FRET）的供体和受体。作者测量了融合蛋白的吸收、荧光发射、激发和荧光衰减，并与游离 CFP、YFP 比较，...
本文报道一种基于荧光寿命的锌离子生物传感器，用于在含干扰离子的溶液（如海水）中定量痕量锌。传感体系由脱锌人碳酸酐酶II（apo-carbonic anhydrase II, apo-CA II）和荧光抑制剂丹磺酰胺（dansylamide, DNSA）组成。Zn2+ 先与 apo-CA II 活性位高亲和力结合，随后诱导 DNSA ...