Methods in enzymology
2017
Gomez-Cambronero J, Morris AJ, Henkels KM
本文介绍研究磷脂酶D(PLD)与信号蛋白相互作用及其产物磷脂酸(PA)调控这些相互作用的方法。PLD对细胞膜稳态、蛋白转运、细胞骨架动态、膜重塑、细胞增殖、减数分裂和孢子形成至关重要;PA是酸性磷脂,参与多种脂质合成,并通过蛋白-脂质相互作用或作为底物影响多种信号蛋白。作者围绕PLD2与小GTP酶Rac2的相互作用,提供共免疫沉淀、...
Biosensors & bioelectronics
2017
Ellairaja S, Shenbagavalli K, Ponmariappan S, Vasantha VS
胆红素是黄疸及其临床诊断的关键生物标志物,亟需更灵敏、简便的分析工具。本文报道了一种基于绿色超声化学法合成的亚胺类双酚荧光分子BAMD的新型光学生物传感器。BAMD具有强荧光、高量子产率(0.85)和870 ps荧光寿命,在生理pH 7.4和碱性pH 9.0下均可通过比色与荧光法检测胆红素。优化条件下,该探针能在多种干扰生物分子和金...
ACS applied materials & interfaces
2017
Kahveci Z, Martínez-Tomé MJ, Mallavia R, Mateo CR
本文报道了一种基于碱性磷酸酶(ALP)抑制的荧光生物传感器。传感器由ALP和阳离子共轭聚电解质HTMA-PFP组成。其工作原理是:ALP催化对硝基苯基磷酸盐(PNPP)水解生成对硝基苯酚(PNP),PNP通过光诱导电子转移和荧光共振能量转移猝灭HTMA-PFP的荧光。由于HTMA-PFP在缓冲液中易聚集且荧光效率低,作者先将其插入磷...
Biochemical and biophysical research communications
2017
Yang H, Pu X, Wang L, Liu L 等 5 人
ΔpH 依赖/Tat 途径仅利用质子动力势驱动蛋白质跨叶绿体类囊体膜运输。9-氨基吖啶荧光淬灭法常用于监测光照下类囊体膜两侧 ΔpH,但对低 ΔpH 值敏感性有限,且膜结合会产生虚假荧光信号。为开发更敏感、能监测类囊体腔真实 pH 的方法,作者将比率型 pH 敏感 GFP 变体 pHluorin 与 prOE17 转运肽融合,转入拟...
Metabolic engineering
2017
Liang WF, Cui LY, Cui JY, Yu KW 等 9 人
乙酰辅酶A是细胞重要中间代谢物,也是多种工业代谢物的前体。甲基杆菌 Methylobacterium extorquens AM1 能以甲醇为唯一碳源,具有丰富辅酶A代谢流,但乙酰辅酶A位于丝氨酸循环、三羧酸循环和乙基丙二酰辅酶A循环等中心代谢路径交汇处,难以高效积累。本文提出传感器辅助转录调控因子工程(SATRE)策略,在引入甲羟...
Analytical and bioanalytical chemistry
2017
Akinloye O, Krishnamurthy R, Wishart D, Goss GG
检测并定量纳米颗粒至关重要,但目前缺乏简单、灵敏且快速的纳米材料检测方法。本研究开发了一种新型肽基荧光生物传感器,用于检测和测量带负电荷的工程纳米颗粒(ENPs)。该传感器由七个赖氨酸经三甘氨酸连接半胱氨酸构成的多肽(Ac-KKKKKKKKGGGC-OH)与荧光探针荧光素-5-马来酰亚胺(F5M)或四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺(TM...
Biosensors & bioelectronics
2017
Hu S, Ouyang W, Guo L, Lin Z 等 7 人
基于新型纳米复合材料Fe3O4/g-C3N4/HKUST-1构建了一种用于赭曲霉毒素A(OTA)的荧光生物传感器。本文首次合成该复合材料,将HKUST-1与g-C3N4结合以提高化学稳定性。该复合材料对染料标记适配体具有强吸附能力,并通过光诱导电子转移(PET)机制完全猝灭染料荧光。当存在OTA时,OTA与适配体高亲和力结合,使染料...
Talanta
2017
Li J, Wang H, Guo Z, Wang Y 等 8 人
本文报道了一种基于石墨相氮化碳(g-C3N4)荧光猝灭的简单荧光生物传感器,用于检测汞(II)离子(Hg2+)。该体系中,经羧基化处理的 g-C3N4 纳米片通过 NHS/EDC 偶联负载 Hg2+ 特异性单链 DNA(ssDNA)适配体;在无 Hg2+ 时,g-C3N4 在 380 nm 激发下于 440 nm 处呈现强荧光。加入...
Biosensors & bioelectronics
2017
Li J, Sun K, Chen Z, Shi J 等 6 人
血管内皮生长因子(VEGF)是肿瘤血管生成的重要生物标志物。本文报道了一种基于DNA组装结构切换与等温扩增的适配体荧光生物传感器,用于检测VEGF165。该策略由等温扩增模板、适配体、引物和保护链组成DNA组装。无靶标时,适配体维持组装结构,阻止引物与模板杂交,等温扩增不能进行;当VEGF165存在时,适配体与靶标结合并从组装中释放...
Biosensors & bioelectronics
2017
Qaddare SH, Salimi A
由于 DNA 检测在疾病诊断、环境监测和食品安全中重要,本文构建了一种超灵敏均相 DNA 生物传感器,用于检测 HIV 相关 DNA 序列。该传感器基于碳点(CDs)与金纳米粒子(AuNPs)之间的荧光共振能量转移(FRET)。CDs 由组氨酸水热法制备,平均粒径 3–4 nm,作为荧光供体;5'-氨基标记的 HIV 捕获探针通过 ...
Biochimica et biophysica acta. Bioenergetics
2017
Tejwani V, Schmitt FJ, Wilkening S, Zebger I 等 7 人
Ralstonia eutropha 是一种可氧化氢的细菌,能在异养与自养代谢之间切换,因而适用于生物氢生产、可降解聚合物和烃类等生物技术。其 H2 氧化在 O2 存在下由四种氢化酶介导,其中可溶氢化酶(SH)可逆地耦合 H2 氧化与 NAD+ 还原为 NADH,并已在体外和体内用于辅因子再生,因此 SH 与细胞 NADH/NAD+...
Journal of fluorescence
2017
Long Q, Wen Y, Li H, Zhang Y 等 5 人
本文报道了一种基于 NaYF4:Yb3+, Tm3+ 上转换纳米粒子(UCNPs)的简单、灵敏的荧光生物传感器,用于银离子(Ag+)的定量分析。Ag+ 可直接将邻苯二胺(OPD)氧化为氧化 OPD(oxOPD)。oxOPD 通过内滤效应(IFE)显著猝灭 UCNPs 的荧光。在优化条件下,UCNPs 荧光强度的变化与 Ag+ 浓度呈...
Biosensors & bioelectronics
2017
Zhang P, Liu H, Li X, Ma S 等 8 人
鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium, S. typhimurium)通过污染农产品或水传播,威胁公共卫生,亟需快速检测方法。本文首次构建一种无标记荧光生物传感器,利用三重触发序列再生链置换扩增(T-SDA)和自保护发夹模板生成支架化银纳米团簇(AgNCs)。活菌存在时,鼠伤寒沙门氏菌适配体与菌体结合,使适配...
Biosensors & bioelectronics
2017
Piscitelli A, Pennacchio A, Cicatiello P, Politi J 等 6 人
为将绿色荧光蛋白(GFP)的荧光发射与I类疏水素Vmh2的黏附能力相结合,设计了一种融合蛋白,并在毕赤酵母Pichia pastoris中异源表达。Vmh2-GFP融合蛋白被证明是研究Vmh2自组装的智能有效工具。由于两种蛋白之间通过凝血酶的特异性切割位点连接,该融合蛋白被用作凝血酶生物传感器中的活性生物元件。当目标溶液中的凝血酶特...
Biosensors & bioelectronics
2017
Ahn JK, Kim HY, Baek S, Park HG
本文报道了一种基于DNA模板铜/银纳米簇(DNA-Cu/Ag NCs)和s-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的荧光检测方法,用于快速、选择性检测腺苷。SAHH可催化s-腺苷同型半胱氨酸(SAH)水解并生成同型半胱氨酸(Hcy),后者通过与DNA-Cu/Ag NCs强相互作用淬灭其荧光;而腺苷能显著抑制该水解反应,阻止Hcy生成,从...
Biosensors & bioelectronics
2017
Shi J, Lyu J, Tian F, Yang M
本文报道了一种基于石墨烯量子点(GQDs)和二硫化钼(MoS2)纳米片的“开启型”荧光生物传感器,用于快速、灵敏地检测上皮细胞黏附分子(EpCAM)。聚乙二醇化 GQDs 作为荧光供体,不仅能显著增强发射强度,还可防止 GQDs 在 MoS2 表面的非特异性吸附。传感平台通过 GQD 标记的 EpCAM 适配体经范德华力吸附于 Mo...
Biosensors & bioelectronics
2017
Xu J, Wei C
本文提出两种基于适配体 DNA 模板银纳米团簇(Ag NCs)的通用且可靠的荧光传感器。两种 DNA-Ag NCs 均可用于无标记检测三磷酸腺苷(ATP),检出限分别为 0.44 mM 和 0.65 mM。其中一种体系进一步用于监测腺苷脱氨酶(ADA)活性。为阐明“点亮”机制,作者研究了由不同 DNA 序列制备的六种 Ag NCs,...
Biosensors & bioelectronics
2017
Jankowska DA, Bannwarth MB, Schulenburg C, Faccio G 等 9 人
人口老龄化和预期寿命延长使伤口患者增加,慢性伤口因需密集护理和持续监测而成为临床难题。本文报道一种用于伤口监测的荧光传感系统,可早期区分自主愈合伤口与慢性伤口。该系统同时监测愈合过程中两个关键波动参数:pH 和葡萄糖浓度。作者将荧光 pH 指示剂 5(6)-羧基萘荧光素(CNF)以及基于葡萄糖氧化酶(GOx)和辣根过氧化物酶(HRP...
Biosensors & bioelectronics
2017
Zhang H, Zhang H, Aldalbahi A, Zuo X 等 6 人
近十年来,石墨烯(graphene)和氧化石墨烯(GO)因可功能化、高比表面积及独特物理电学性质,在能源、生物传感和生物医学诊疗中受到广泛关注。基于其荧光猝灭特性的荧光生物传感器尤其重要:荧光标记探针(如分子信标、适配体、DNAzyme等)吸附到石墨烯/GO表面后荧光被猝灭;当靶标存在时,探针与靶标强相互作用并从表面脱附,产生显著荧...
Biosensors & bioelectronics
2017
Robertson NM, Toscano AE, LaMantia VE, Hizir MS 等 8 人
本研究利用解锁核苷酸(UNA)在二维纳米氧化石墨烯(nGO)平台上检测乳腺癌相关微小RNA miR-10b,并区分同家族中仅存在单核苷酸差异的miR-10a和双核苷酸差异的miR-10c。FAM标记的单链DNA探针可被nGO吸附并猝灭荧光,靶标miRNA杂交后使探针从表面释放,从而恢复荧光。作者比较了全互补探针DNAfull、含两个...