Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2015
Kellenberger CA, Hallberg ZF, Hammond MC
开发荧光生物传感器的主要动机是实时监测细胞内代谢物水平。大多数可遗传编码的荧光传感器基于受体蛋白与荧光蛋白结构域的融合,但许多小分子代谢物缺乏已知蛋白受体,且基于蛋白受体的FRET传感器工程化困难。近年来,小分子结合核糖开关通过与体外筛选的Spinach适配体融合,被改造为荧光生物传感器;Spinach可结合前荧光、细胞可渗透的GF...
Analytical chemistry
2015
Yin C, Wang M, Lei C, Wang Z 等 10 人
蛋白磷酸化由蛋白激酶催化,在细胞内信号转导、代谢、基因表达和免疫应答等过程中起关键作用,因此检测激酶活性对生化研究和药物发现具有重要意义。本文开发了一种基于半合成绿色荧光蛋白(GFP)磷酸化介导组装的新型荧光生物传感器,用于无标记检测蛋白激酶活性。作者合成了由GFP第10条β链(s10)与激酶底物肽组成的嵌合肽S-peptide。蛋...
ACS applied materials & interfaces
2015
Lin HC, Lin JJ, Sheng YJ
本文报道了一类用于细菌检测的新型荧光纳米硅酸盐片层杂化材料。尺寸为100×100×1 nm的纳米硅酸盐片层(NSP)由天然钠蒙脱石(Na+-MMT)剥离获得,具有对细菌表面的亲和性。NSP表面同时存在离子电荷(≡Si-O-Na+)和硅氧醇基团(≡Si-OH),可通过溶胶-凝胶反应和活性聚合进行有机修饰,在片层边缘共价接枝聚(2-羟乙...
PloS one
2015
Monen J, Hattersley N, Muroyama A, Stevens D 等 6 人
在多数真核生物中,着丝粒由含 CENP-A 的染色质表观遗传定义。秀丽隐杆线虫有两个 CENP-A 相关蛋白:HCP-3(CeCENP-A)和 CPAR-1。先前 RNAi 替代实验显示 HCP-3 是功能优势亚型,CPAR-1 在胚胎中不可检测。GFP::CPAR-1 在双线期装载到减数分裂染色体,并富集于二价染色体。本文显示,G...
Analytica chimica acta
2015
Thirupathi P, Neupane LN, Lee KH
本研究采用固相合成法制备了三种基于短肽(1–3聚精氨酸)的荧光传感器(1–3),用于血清中肝素的监测。传感器2和3在10 mM HEPES缓冲液(pH 7.4)及2%人血清中均对肝素表现出灵敏的比值响应:芘单体376 nm发射降低,同时芘激基复合物480 nm发射增强;传感器1仅表现为376 nm单体发射降低的关型响应。2和3对肝素...
Nano letters
2015
Mishina NM, Mishin AS, Belyaev Y, Bogdanova EA 等 7 人
在多种超分辨显微技术中,受激发射损耗(STED)显微术能在高空间分辨率下实现最佳时间分辨率,从而支持突破衍射极限的活细胞成像。然而,STED 及多数超分辨方法通常只从原始数据中提取荧光团位置信息。为拓展超分辨技术的应用,本文报道了一种动态生物传感器的活细胞 STED 显微成像。作者使用荧光过氧化氢传感器 HyPer2 进行亚衍射成像...
Chemical communications (Cambridge, England)
2015
Chaudhary PM, Murthy RV, Yadav R, Kikkeri R
本文报道了一类用于检测细胞表面唾液酸(sialic acid, Sia)的肽模拟物生物传感器。作者以含苯硼酸和精氨酸的短肽为识别元件,通过生物素将其与荧光链霉亲和素偶联,实现细胞的光学标记。糖微阵列实验表明,P-1 对 Sia 具有选择性结合,而对甘露糖、半乳糖和岩藻糖结合较弱;P-1 与 Sia 的解离常数达亚微摩尔水平,接近商品...
The Analyst
2015
Lu LF, Li YY, Zhang M, Shi G
本文设计了一种无标记分子信标(MB)类荧光生物传感器,用于检测过氧化氢(H2O2)和葡萄糖。该体系基于AT富集单链DNA(ATprobe)对Hoechst染料的荧光调控,其中Hg2+和半胱氨酸(Cys)作为激活/调节元件。ATprobe可在Hg2+诱导下通过T–Hg2+–T复合物形成发夹结构,为Hoechst染料提供结合宿主,使其荧...
Talanta
2015
Chen Q, Guo Q, Chen Y, Pang J 等 6 人
本文报道了一种基于G四链体杂交链反应(HCR)的无酶、无标记荧光生物传感器,用于小分子检测,并以三磷酸腺苷(ATP)为模型靶标。传感器由ATP适配体探针、阻断探针、两个发夹探针H1和H2以及荧光染料N-甲基原卟啉IX(NMM)组成。H1中嵌入G四链体序列。无ATP时,适配体探针与阻断探针退火,H1和H2保持发夹状态,NMM荧光较弱。...
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
2015
Kellenberger CA, Wilson SC, Hickey SF, Gonzalez TL 等 11 人
环状二核苷酸是一类调控细菌生理过程的重要第二信使。环状 AMP-GMP(cAG,又称 3′-5′ cGAMP)的合成酶 DncV 与霍乱弧菌高感染性相关,但其在多数细菌中的分布和功能仍不清楚。本文发现环境细菌硫酸盐还原地杆菌(Geobacter sulfurreducens)可产生 cAG,并利用 GEMM-I 类核糖开关中的一个亚...
Protein engineering, design & selection : PEDS
2015
Gallo E, Snyder AC, Jarvik JW
近期报道的荧光生物传感器平台利用单链抗体片段(scFv)选择性结合并激活原本无荧光的荧光素分子。本研究将串联 scFv 生物传感器展示于哺乳动物细胞表面,以推进荧光检测策略。作者首先筛选不同肽连接子,发现柔性连接子或 α-螺旋连接子连接的串联蛋白可正确折叠并展示于细胞表面。随后进行 scFv 二聚体组合研究,发现荧光激活与 scFv...
Biosensors
2015
Jeong HJ, Itayama S, Ueda H
雷帕霉素(Rapamycin/Sirolimus)是器官移植后最常用的免疫抑制剂之一,并显示抗肿瘤活性,因此移植或肿瘤治疗后监测其血药浓度具有重要临床意义。现有雷帕霉素检测方法灵敏度有限,或需要复杂步骤和较长检测时间。本文提出一种基于荧光淬灭释放原理的新型雷帕霉素荧光生物传感器“Q’-body”。该传感器受抗体淬灭体(Q-body)...
ACS applied materials & interfaces
2015
Zhu Y, Cai Y, Xu L, Zheng L 等 7 人
双酚A(BPA)是聚碳酸酯和环氧树脂生产中的重要工业化学品,也广泛存在于食品包装、餐具及环境水样中,具有内分泌干扰风险。本文基于氧化石墨烯(GO)和抗BPA适配体构建了一种新型荧光生物传感器,用于一步法检测BPA。GO具有大比表面积和强荧光猝灭能力,可特异性吸附并猝灭荧光标记单链DNA探针的荧光;当BPA与抗BPA适配体结合后,适配...
Spectrochimica acta. Part A, Molecular and biomolecular spectroscopy
2015
Zhang H, Ruan Y, Lin L, Lin M 等 7 人
本文报道了一种基于DNAzyme特异性识别和二硫化钼(MoS2)纳米片荧光猝灭能力的水环境中铀酰离子(UO2 2+)荧光生物传感器。该DNAzyme由酶链39E和6-羧基荧光素(FAM)标记的底物链39S组成。在无UO2 2+时,底物-酶复合物DNAzyme与MoS2纳米片亲和力低,体系保持较强荧光;加入UO2 2+后,UO2 2+...
Scientific reports
2015
Tang HL, Tang HM, Fung MC, Hardwick JM
哺乳动物细胞在晚期凋亡后仍可存活,挑战了活性半胱天冬酶(caspase)必然预示死亡的观念,但目前缺乏工具追踪曾发生 caspase 活性的健康细胞。为判断完整动物中细胞能否经历凋亡逆转(anastasis),作者开发了用于果蝇的双色 CaspaseTracker 生物传感器系统,用于识别具有当前或既往 caspase 活性的细胞。...
Scientific reports
2015
Heger Z, Cernei N, Krizkova S, Masarik M 等 9 人
本文报道了一种基于Förster共振能量转移(FRET)的超灵敏、特异性生物传感系统,用于检测肌酸(sarcosine,Sar)这一前列腺癌潜在生物标志物。该FRET生物传感器将抗肌酸抗体固定在顺磁性纳米颗粒表面,以实现抗原的特异性结合。肌酸成功结合后,由抗肌酸抗体组装成三明治结构,使FRET供体-受体对保持在所需的Förster距...
Journal of colloid and interface science
2015
Wang L, Liu S, Liang W, Li D 等 6 人
本文设计了一种基于谷胱甘肽(GSH)包覆碲化镉(CdTe)量子点(QDs)荧光“关-开”可逆变化的生物传感器,用于检测鲱鱼精子 DNA(hsDNA)。该传感器利用硫酸多粘菌素 B(PMBS)与 hsDNA 的相互作用作为固有识别性能,并以 GSH 包覆 CdTe QDs 的荧光转变作为外部信号。由于 QDs 到 PMBS 的光诱导电...
Biosensors & bioelectronics
2015
Lee J, Park IS, Kim H, Woo JS 等 6 人
肽核酸(PNA)具有比天然核酸探针更高的化学/生物稳定性、特异性和对靶核酸的结合亲和力,但其生物分析应用常受限于在疏水表面的非特异性吸附。本文采用牛血清白蛋白(BSA)作为添加剂,以提高PNA在疏水容器中的稳定性,并改善基于氧化石墨烯(GO)和PNA的DNA荧光传感器性能。在PNA溶液中加入0.01% BSA可有效防止PNA吸附到疏...
Analytical chemistry
2015
Jia Y, Zuo X, Lou X, Miao M 等 8 人
受自然界分子识别与信号响应机制启发,作者设计了一种两亲性共轭聚合物-DNA复合信标,用于高灵敏检测蛋白和离子。该探针由亲水性DNA部分和疏水性共轭聚合物(CP)单元组成,在水溶液中可自组装形成以CP为疏水核、DNA为亲水壳的胶束;由于聚集诱导荧光猝灭(ACQ)效应,CP荧光被抑制。加入端粒酶后,端粒酶催化DNA探针延长,显著改变探针...
Sensors (Basel, Switzerland)
2015
Carullo P, Cetrangolo GP, Mandrich L, Manco G 等 5 人
有机磷化合物含有磷酸或硫代磷酸键,主要用作农药,也可作为化学战剂。传统 GC-MS 和 LC-MS 方法灵敏但难以现场实时检测。本研究利用 Alicyclobacillus acidocaldarius 酯酶2(EST2)对有机磷化合物的高亲和结合,通过分子对接评估其对对氧磷(paraoxon)及对硫磷(parathion)、毒死蜱...