Journal of visualized experiments : JoVE
2018
Machen AJ, O'Neil PT, Pentelute BL, Villar MT 等 6 人
体内蛋白常以大型大分子复合物形式存在,其结合特异性与动态变化决定功能输出。本研究在生物层干涉(BLI)生物传感器表面组装并转化炭疽毒素前内体复合物。首先,将半胱氨酸突变的致死因子 N 端(LFN)通过二硫键以最佳取向偶联至 BLI 传感器,使保护性抗原前孔(PAprepore)结合,Kd 约 1 nM。取向优化的 LFN-PApre...
Biochimica et biophysica acta
2011
Archakov AI, Ivanov YD
原子力显微镜(AFM)可可视化并计数多蛋白体系中的单个蛋白及其复合物;光学生物传感器(OB)可提供复合物形成动力学、寿命(τLT)和亲和力。将τLT与催化循环时间(τcat)比较,可区分有效与非有效复合物。本文综述AFM与OB在细胞色素P450 101、P450 11A1和P450 2B4三种单加氧酶体系中的应用。AFM在三个体系中...
Analytical and bioanalytical chemistry
2009
Durand NF, Saveriades E, Renaud P
本文提出并实验验证了一种基于纳米流体通道稳态扩散的蛋白复合物形成生物传感方法。利用纳米限域空间降低生物分子有效扩散系数的特性,该方法可监测两种蛋白之间的结合亲和力。作者建立了纳米缝中蛋白浓度分布的理论模型,表明由两个结合生物分子形成的复合物在纳米通道中受驱动时,其稳态荧光扩散轮廓比单个蛋白更宽。实验采用荧光标记链霉亲和素(Alexa...
Biosensors & bioelectronics
2008
Treitz G, Gronewold TM, Quandt E, Zabe-Kühn M
本文报道将 S-sens® K5 表面声波(SAW)生物传感器与质谱联用(SAW-MS),用于分析由人凝血级联因子 α-凝血酶(thrombin)和血浆特异性抑制剂抗凝血酶 III(antithrombin III, ATIII)组成的蛋白复合物。利用 S-sens® K5 传感器实时记录 ATIII 与凝血酶的特异性结合过程;芯片...