BioMed research international
2014
You ZH, Li S, Gao X, Luo X 等 5 人
蛋白-蛋白相互作用(PPI)是细胞功能的基础,在分子水平研究这些相互作用对理解生命活动至关重要。过去十年,生物传感器已成为高通量鉴定蛋白及其相互作用的重要工具,但高通量实验方法耗时且昂贵,且大规模PPI数据常伴随较高假阳性和假阴性率。针对这些问题,作者提出一种将基于生物传感器的PPI数据与新型计算模型相结合的大规模PPI检测方法。该...
Assay and drug development technologies
2014
Hua Y, Shun TY, Strock CJ, Johnston PA
本文报道了一种用于筛选可预防或破坏雄激素受体(AR)与转录中介因子2(TIF2)蛋白-蛋白相互作用(PPI)的高内容定位生物传感器检测法。重组腺病毒分别表达融合红色荧光蛋白(RFP)的AR配体结合域/激活功能2表面域(含核定位与核输出序列)和融合绿色荧光蛋白(GFP)的TIF2三个LXXLL基序(含HIV Rev核仁定位序列)。未刺...
Analytical and bioanalytical chemistry
2014
Azad T, Tashakor A, Hosseinkhani S
生物发光体系因量子产率较高、可在绿到红宽光谱范围发射光子,被视为生物分析中有力的报告系统。生物化学事件通常由大型蛋白机器完成,这些分子复合物由少数至多个蛋白通过相互作用组装而成,蛋白-蛋白相互作用对细胞生物活性至关重要。分裂荧光素酶互补实验使研究两个或多个相互作用蛋白成为可能:将荧光素酶的两个结构域分别连接至两个相互作用蛋白,当蛋白...
Biosensors & bioelectronics
2014
Nirantar SR, Li X, Siau JW, Ghadessy FJ
作者基于此前开发的模块化均相肽基生物传感器,将核酸酶保护检测的基本机制移植到蛋白体系,建立蛋白酶排除(PE)检测。该检测将蛋白-肽识别区、邻近蛋白酶切割位点和信号产生单元整合于同一检测肽或融合蛋白支架中;当靶蛋白结合识别肽时,空间位阻阻止蛋白酶接近切割位点,信号被抑制;当蛋白-蛋白相互作用被小分子或肽类拮抗剂阻断时,蛋白酶可切割检测...
Journal of molecular neuroscience : MN
2014
Khan SS, Lee FJ
大麻素 CB1 受体(CB1)与多巴胺 D2 受体(D2R)均为 G 蛋白偶联受体,均偶联抑制性 Gαi/o 蛋白,激活后可抑制 cAMP 生成。既往研究提示多巴胺系统与内源性大麻素系统之间存在功能串扰。本研究利用共表达两种受体的 HEK-293T 细胞,通过共免疫沉淀实验证实 CB1 与 D2R 可形成复合物。作者进一步构建 D2...
Inorganic chemistry
2014
Rajendran M, Yapici E, Miller LW
为在活细胞中实时监测蛋白质的亚细胞定位、激活和相互作用,基于 FRET 的荧光蛋白生物传感器可实现高空间分辨率成像,但非特异荧光背景常掩盖微小 FRET 变化。采用 Tb(III) 或 Eu(III) 镧系配合物作为供体、GFP 等作为受体可克服该问题。其关键是 Tb(III) 配合物毫秒级长寿命发光与时间门控显微镜:脉冲激发后短暂...