酪蛋白影响乳品凝固、收率和产品质量。本研究旨在开发并验证一种基于木瓜蛋白酶（EC 3.4.22.2）的生物传感器，用于定量全脂乳中的酪蛋白，评价其动力学行为，并与高效液相色谱（HPLC）进行比较。方法上，将木瓜蛋白酶固定在尼龙膜和木薯淀粉生物聚合物上，测定酶动力学（KM）、稳定性、灵敏度、精密度和线性，并采用t检验（α=0.05）比...
基于酶的生物传感器通常采用滴涂法进行表面修饰，但该方法存在重现性低、咖啡环效应明显以及难以规模化生产等缺点，限制了其实际应用。为克服上述限制，本文提出一种用于无试剂酶基生物传感器的喷墨打印酶交联表面功能化策略。该方法在丝网印刷电极上依次打印酶层、交联层和保护层，并在喷墨打印过程中将纳米材料与反应底物共同预载。喷墨打印电极可实现酶的均...
本研究旨在确定哪种电化学沉积羰基功能化聚合物最适合作为直接共价固定生物催化剂（酶）的电极基底。为此，构建了三种导电聚合物（聚香兰素、聚反式肉桂醛、聚4-羟基苯甲醛）与酪氨酸酶和碱性磷酸酶组合的安培生物传感器，用于检测神经递质（多巴胺、肾上腺素、去甲肾上腺素、5-羟色胺）和苯基磷酸盐（对氨基苯基磷酸盐、对苯二酚二磷酸盐）。聚合物通过线...
为监测患者血糖，本研究制备了基于石墨棒（GR）电极的电化学葡萄糖生物传感器，电极表面电化学修饰树枝状金纳米结构（DGNs）并固定葡萄糖氧化酶（GOx），以吩嗪甲磺酸盐（PMS）为可溶性氧化还原介质。比较了三种GOx固定化方法：吸附于DGNs并用戊二醛（GA）蒸气交联（GA-GOx/DGNs/GR）、共价固定于11-巯基十一酸自组装单...
D-氨基酸氧化酶（DAAO）可结合多种 D-氨基酸且亲和力不同，因此开发具有选择性的 DAAO 酶生物传感器仍是实际应用中的挑战。本文提出一种构建具有不同底物选择性生物传感器的方法。首先，通过理性设计在 DAAO 中引入点突变，提高其对 D-丝氨酸的选择性。随后，对野生型酵母 DAAO（RgDAAO WT）以及人源 DAAO W20...
本研究首次将漆酶（Laccase, Lac）固定化于腰果胶（cashew gum, CG）纳米颗粒，制备漆酶-腰果胶纳米颗粒（LacCG-NPs），并将其用作电化学生物传感器的生物层。LacCG-NPs 采用纳米沉淀法合成，并通过紫外-可见光谱、原子力显微镜、扫描电镜、ATR-FTIR、圆二色光谱、循环伏安法和电化学阻抗谱进行表征；...
酶基电化学生物传感器在实际应用中常面临底物特异性不足、批次间重现性差以及缺乏针对酶固定化效应的定量评价手段等挑战。本文提出一种快速、简便且通用的电化学方法，用于测量酶固定化及共价交联对酶催化活性和底物特异性的影响。该方法适用于催化循环中释放过氧化氢（H2O2）的酶基电化学生物传感器，通过检测 H2O2 在电极表面的氧化电流来定量酶促...
本研究将葡萄糖氧化酶（GOx）浸泡负载于多孔单壁碳纳米管（CNT）薄膜中，该薄膜涂覆于铂盘电极表面，并在顶部覆盖一层阴极电泳沉积漆（EDP）。所得传感器在+0.6 V（vs. Ag/AgCl）下进行安培检测，通过氧化GOx催化葡萄糖产生的过氧化氢（H2O2）产生电流信号。传感器对葡萄糖的响应线性范围可达40 mM，检出限为50 μM...
本研究利用分散良好的碳纳米管（CNTs）构建高灵敏度酚类电化学生物传感器。将完整未酸处理的多壁CNTs分散于水溶性酪氨酸酶（TYR）溶液中，通过酶吸附、硫酸铵沉淀和戊二醛交联（EAPC）将TYR固定化。EAPC每毫克CNTs的TYR活性分别比酶吸附（EA）和酶吸附/交联（EAC）高10.5倍和5.4倍；40 °C孵育128 h后仍保...
本研究结合原位自由基聚合与非共价吸附，构建新型生物无机催化界面并研究组装机制。先用 N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺（NAS）将有机磷水解酶（OPH）赖氨酸残基接枝丙烯酰基，再在室温下通过自由基聚合在酶表面生长可渗透聚合物壳，形成蛋白纳米胶囊（nOPH10）；随后纳米胶囊通过静电、氢键等非共价作用组装到氧化石墨烯（GO）表面，形成双固定化酶...
本研究以三种不同烷基链长的咪唑基离子液体（[Cnmim]Br，n=2、6、12）水溶液为介质，合成离子液体-聚吡咯（IL-PPy）复合材料。其中离子液体分别作为吡咯溶剂、聚吡咯乳液聚合介质和聚吡咯掺杂剂。通过循环伏安、差分脉冲伏安等电化学实验比较三种IL-PPy修饰玻璃碳电极（GCE）的性能，发现[C12mim]Br-PPy（C12...
本文通过氢氟酸刻蚀Ti3AlC2前驱体剥离制备了二维过渡金属碳化物MXene-Ti3C2。SEM和XRD结果表明，所得MXene具有类石墨烯二维纳米结构，表面部分以-OH终止，可为酶固定化提供适宜微环境并维持其生物活性与稳定性。基于MXene的金属导电性、生物相容性和水相分散性，作者将其作为新型载体固定化酪氨酸酶，构建无介质电化学生...
本研究采用物理吸附法将脯氨酸脱氢酶（PRODH）固定化于磁性介孔硅纳米材料Fe3O4-MCM-41-nPrNH2中，并系统考察其固定化与电催化活性。该磁性介孔硅网络比表面积达362 m2 g-1，有利于PRODH包埋，并显著提高酶对温度和pH失活的耐受性；在分析液温度达70 °C时仍保持对L-脯氨酸氧化的电催化电流响应。将包埋PRO...
本文报道了一种改进的甘油生物传感器，通过新型硫化亚铁（FeS）单分子导线，将NAD+甘油脱氢酶（GlDH）辅酶-酶蛋白复合物直接固定于金电极。作者采用动态恒电位安培法，在非缓冲条件、1.3 V下评价FeS基与传统PQQ基传感器的灵敏度、检出限和响应时间。在1–25 mM甘油范围内，FeS基传感器灵敏度较PQQ基提高77%，检出限降低...
本文报道了一种基于钛酸盐纳米线（TNW）修饰丝网印刷电极的过氧化氢生物传感器。钛酸盐纳米线由二氧化钛经水热法合成，并通过3-氨基丙基三甲氧基硅烷（APTMS）和戊二醛（GLU）表面功能化，以共价方式固定辣根过氧化物酶（HRP），酶负载量为1.62 mg/m2。将含酶TNW滴涂于丝网印刷碳电极工作电极表面，并用10% Nafion乙醇...
氮掺杂碳点被引入作为适合酶固定化的新型基底，用于电化学检测方法。氮掺杂碳点可由聚丙烯酰胺一步合成。借助壳聚糖上的氨基，葡萄糖氧化酶通过氨基-羧基反应固定在氮掺杂碳点修饰的玻璃碳电极上。氮掺杂碳点中氮诱导的电荷离域可增强对氧气还原的电催化活性。特异性氨基-羧基反应为葡萄糖氧化酶在电极上的固定提供强而稳定的结合。所开发生物传感器在血清样...
本文报道了一种用于尿素检测的电导法生物传感器。该传感器采用非典型固定化方法，将大肠杆菌来源的重组脲酶通过物理吸附固定在硅白沸石（silicalite）纳米多孔颗粒上，再构建于差分电导换能器表面。与常规固定化相比，该制备过程简单、快速，不使用戊二醛等有毒化合物，且重现性较高（RSD=5.1%）。传感器对尿素的线性检测范围为0.05–1...
本研究利用胆固醇酯酶（ChE）、胆固醇氧化酶（ChO）和辣根过氧化物酶（HRP）三种酶构建安培型生物传感器，用于血清总胆固醇检测。工作电极核心由化学合成的金纳米颗粒（AuNPs）和羧基化多壁碳纳米管（c-MWCNTs）组成，ChO、ChE 和 HRP 通过 c-MWCNTs 羧基与酶氨基形成酰胺键共价固定于电极表面，最后涂覆聚丙烯酰...
本研究构建了一种基于漆酶（Laccase, LAC）的安培生物传感器，用于检测酚类化合物。LAC 通过酶吸附、沉淀和交联（EAPC）三步法固定于聚苯胺纳米纤维（PANFs）多孔基质中。与仅酶吸附（EA）和酶吸附-交联（EAC）样品相比，EAPC 固定的 LAC 具有更高活性和稳定性。按单位 PANF 重量计，EAPC 的活性分别为 ...
本研究开发了一种基于安培原理、固定化 Trametes versicolor 漆酶的可重复使用生物传感器探针，用于检测邻位取代酚类衍生物。系统比较了漆酶在玻璃纸膜上的多种固定化方法，并考察不同蛋白质基稳定剂对固定化酶电极操作稳定性的增强作用。结果表明，以牛血清白蛋白（BSA）为稳定剂的共交联固定化方法在灵敏度、检出限、响应时间及操作...