开发高性能、低成本体外诊断工具对感染性疾病治疗与传播控制至关重要。核酸检测中，摆脱酶介导扩增可降低诊断时间与复杂度。抗菌药物耐药（AMR）使体外诊断作用日益重要。本文报道一种无需扩增的电化学CRISPR/Cas生物传感器（E-Si-CRISPR），利用银金属化检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。靶向MRSA mecA基因的定制...
本文设计了一种基于CRISPR/Cas12a系统的无PCR双模电化学生物传感器，用于灵敏、可靠地检测转基因大豆SHZD32-1。作者合成功能化复合生物纳米材料Fe3O4@AuNPs/DNA-Fc&Ru作为信号单元，其中Fe3O4纳米颗粒包覆AuNPs，表面通过Au-S键固定5′端带Fc、3′端带巯基的ssDNA-Fc，并通过Au-N...
本研究提出一种基于三维DNA walker的CRISPR/Cas12a（LbCpf1）介导电化学发光（ECL）纸基平台，用于超灵敏检测miRNA-141。首先，将具有大负载空间的三维还原氧化石墨烯（3D-rGO）修饰在纸基工作电极（PWE）上，构建高导电基底并促进金钯纳米颗粒（AuPd NPs）生长。随后，AuPd NPs作为3D-...
本文报道了一种基于CRISPR/Cas12a介导的脂质体放大策略的光电化学生物传感器，用于人乳头瘤病毒（HPV）相关DNA的定量检测。该传感器以钕掺杂溴化氧化铋（Nd-BiOBr）纳米片作为光活性半导体基质，构建于FTO导电玻璃上。将磁性微球与载多巴胺脂质体共价连接于单链DNA两端，形成哑铃状载多巴胺脂质体编码磁性微球（DLL-MB...
低丰度PIK3CA H1047R基因突变检测对乳腺癌临床诊断和治疗至关重要。本文建立了一种结合级联链置换扩增（C-SDA）与CRISPR/Cas12a反式切割活性的荧光生物传感器，用于超灵敏检测PIK3CA H1047R突变。突变基因片段可与互补序列结合，形成内切酶FspI的完整识别位点；在FspI介导下，突变位点被切割并产生DNA...
本文首次将CRISPR/Cas系统引入无固定化电化学传感平台，用于高灵敏、高特异检测疾病相关核酸和小分子。该策略采用模块化滚环扩增（RCA）将靶标识别事件转化为通用触发DNA链，并以此激活CRISPR/Cas12a的脱氧核糖核酸酶活性，实现进一步信号放大。靶标激活的阻断探针被切割后，亚甲基蓝标记的报告探针可被还原氧化石墨烯修饰电极捕...
转录因子（TFs）是调控基因表达的关键蛋白，其水平异常与多种疾病密切相关。本文开发了一种基于CRISPR/Cas12a的荧光生物传感器，用于在核酸外切酶保护实验辅助下定量检测转录因子水平。作者设计了一种双链DNA激活剂，其中嵌入TFs结合域，并包含可激活Cas12a的PAM及crRNA可识别序列。当TFs与激活剂结合时，蛋白-DNA...
小孢子虫（Cryptosporidium parvum）是一种具有重要人畜共患意义的肠道原虫，可在全球人类及家畜、野生动物中引起隐孢子虫病。IId 亚型家族（SF）是 C. parvum 中最常见的亚型之一。部分 CRISPR/Cas 系统已用于核酸检测，具有灵活性、灵敏性和特异性。本研究将重组酶聚合酶扩增（RPA）与 Cas12a...
本文报道了一种将“适配体-锁链”DNA与CRISPR/Cas12a引导的生物传感相结合，用于灵敏快速分析三聚氰胺的方法。通过三种策略设计DNA传感器，并在有无三聚氰胺条件下用圆二色性光谱和等温滴定量热法表征。优化检测参数后，检出限低至38 nM，低于婴幼儿乳品中三聚氰胺允许阈值1.0 mg/kg。传感器对三聚氰胺相对氰尿酸、氨蝶啶和...
单核细胞李斯特菌是重要食源性致病菌，可引发高死亡率的李斯特菌病，因此需要高特异性、高灵敏度和可推广的检测平台。CRISPR/Cas系统因Cas效应蛋白的反式切割能力，在核酸检测生物传感器中具有重要潜力。本研究将CRISPR/Cas12a的反式切割活性引入电化学生物传感器（E-CRISPR），并结合重组酶辅助扩增（RAA），建立低成本...
快速诊断、患者隔离和接触追踪是控制2019冠状病毒病（COVID-19）传播的关键措施。核酸检测仍是当前诊断标准，但多依赖中心实验室，耗时较长。本文报道一种便携式现场检测系统CODA（CRISPR光学各向异性检测），将等温核酸扩增、CRISPR/Cas12a激活和信号产生整合于单一反应体系中，减少人工操作。该系统以荧光各向异性的比率...
本文利用CRISPR/Cas12a系统对靶标核酸的高精度识别及其反式切割能力，发展了一种面向非核酸分析物的荧光生物传感器。作者首先以功能DNA（fDNA）调控方式高效激活Cas12a的侧向切割活性，突破其主要用于核酸检测的局限；随后分别选用ATP适配体和Na+依赖DNAzyme作为信号转导元件，将检测范围扩展至小分子ATP和金属离子...
转录因子（TFs）是决定细胞命运的关键蛋白，已被认为是疾病诊断和治疗的重要标志物。本文报道了一种基于CRISPR/Cas12a系统的高灵敏转录因子生物传感器。该传感器基于Cas12a-crRNA与TFs对一种称为激活剂的双链DNA（dsDNA）的竞争性结合。无TF时，激活剂可被Cas12a-crRNA识别并引发Cas12a的DNas...