Analytical and bioanalytical chemistry
2021
Lu H, Zhu L, Li W, Hu S 等 6 人
CD147参与多种生理过程,并在肿瘤转移中发挥重要作用,其糖基化状态决定多种生物学功能。目前几乎没有可用于活细胞中检测CD147糖基化的传感器,因此迫切需要开发选择性、连续性的细胞成像生物传感器。基因编码荧光共振能量转移(FRET)传感器为分析提供了新途径。作者设计并构建了新型基因编码FRET蛋白,通过测量两个分子间基序的FRET比...
The international journal of biochemistry & cell biology
2018
Liu Y, Chen LY, Zeng H, Ward R 等 13 人
大麻素受体1(CB1)主要表达于神经系统,调控学习记忆、疼痛和能量代谢,但缺乏直接测量其激活的方法。本研究构建了一种CB1分子内荧光共振能量转移(FRET)传感器,通过监测第三胞内环与C端尾之间的结构变化来测量CB1激活。CB1激动剂诱导FRET信号随时间和浓度增加,对应第三胞内环与C端尾距离缩短,并伴随胞内Ca2+动员、cAMP积...
Nature communications
2018
Jepsen MDE, Sparvath SM, Nielsen TB, Langvad AH 等 7 人
荧光RNA适配体可用于细胞内RNA分子追踪和生物传感器构建。基于荧光蛋白的FRET已用于检测构象变化,但尚未用于荧光RNA适配体。本文利用单链RNA折纸支架开发了基于RNA适配体的FRET(apta-FRET)系统。为实现FRET,将Spinach和Mango荧光适配体在RNA支架上近距离排列,并合成新荧光团YO3-biotin以提...
Bioscience, biotechnology, and biochemistry
2016
Kikuta S, Hou BH, Sato R, Frommer WB 等 5 人
海藻糖是哺乳动物细胞中的应激保护剂和自噬诱导剂,但其胞内有效浓度处于微摩尔至毫摩尔范围,传统 HPLC 等碳水化合物检测方法最低可测浓度不低于 1 mM,且细胞提取过程可能造成降解,难以实现微尺度、非破坏性定量。本文报道一种基于 Förster 共振能量转移(FRET)的遗传编码海藻糖监测技术。作者将 CFP 与 mVenus 分别...
Science signaling
2013
Takahashi T, Shibasaki T, Takahashi H, Sugawara K 等 8 人
本文研究抗糖尿病磺脲类药物(SU)与cAMP协同激活Epac2A的机制。作者利用MIN6-K8s细胞中的Epac2A FRET荧光传感器,检测8-pCPT-2'-O-Me-cAMP-AM(8-pCPT)及多种SU药对Epac2A的激活。结果显示8-pCPT浓度依赖性地降低FRET效率;格列本脲、格列吡嗪、乙酰己脲在≥10 μM,格列...