为突破光学生物传感的亮度极限，本文报道了一种基于 Förster 共振能量转移（FRET）的超亮核酸检测纳米探针。该探针以约40 nm的染料负载聚甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸（PMMA-MA）纳米颗粒为光收集纳米天线，颗粒内含有约3200个罗丹明供体染料（R18/F5-TPB）。作者通过引入含羧基和叠氮的双官能团连接子，实现聚合物纳米...
细菌耐药性增加对人类健康构成严重威胁，亟需新型杀菌材料。本文报道了一种基于阳离子共轭聚电解质[9,9-双(6′-甲基咪唑鎓溴化物)己基)芴-co-4,7-(2,1,3-苯并噻二唑)]（PFBT-MI）的免洗细菌成像与抗菌方法。PFBT-MI侧链咪唑鎓基团提高水溶性，并通过静电作用结合带负电细菌膜，触发聚集诱导荧光共振能量转移（FRE...
本文提出对一种用于短非编码 RNA 检测的核酸生物传感器进行结构改造与化学修饰，以解决复杂生物基质中 RNA 分析面临的非特异结合和内源核酸酶降解问题。该传感器由 Reporter 和 Probe 两条部分互补核酸链组成，通过链置换与 FRET 荧光增强机制检测目标 RNA。研究在 Probe 3'端引入 DNA 茎区，提高 Rep...
我们建立了一种新型时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）检测方法，用于筛选能调节肌动蛋白-肌球蛋白结构与功能的小分子。肌动蛋白-肌球蛋白相互作用对细胞产生力和运动至关重要，其突变或翻译后修饰可破坏肌肉功能并导致危及生命的综合征。本研究将荧光供体连接在肌动蛋白 C374 位点，将非荧光受体连接在包含骨骼肌肌球蛋白必需轻链长亚型 N...
本文报道了一种由二氧化硅纳米纤维表面包覆上转换纳米颗粒构成的柔性膜，用于 microRNA 检测。作者通过静电纺丝和 800 °C 煅烧制备柔性 SiO2 纳米纤维，再经溶热法在其表面组装 NaYF4:Yb,Er 上转换纳米颗粒（UCNPs），形成 SiO2@UCNP 纤维；随后通过酰胺反应接枝含 BHQ3 淬灭剂的羧基分子信标（C...
本文报道了一类用于定量活细胞中游离烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）及还原型/氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH/NADP+）比值的半合成荧光生物传感器。传感机制是通过 NAD(P) 与传感器蛋白组分结合，调控两个合成荧光团的空间距离，从而改变荧光共振能量转移（FRET）效率。该传感器具有大动态范围、长波长激发、pH 不敏感、...
血管紧张素II 1型受体（AT1R）介导血管紧张素II（AngII）的钙依赖性作用，钙调蛋白（CaM）是细胞内钙信号关键转导分子。已知AT1R亚膜域3和4可与CaM结合，但结合位点、生化性质及功能意义尚不清楚。本研究采用FRET生物传感器筛选法，在AT1R亚膜域2（氨基酸125–141）发现新的CaM结合位点，并确认亚膜域3及亚膜域...
端粒酶在正常体细胞中不活跃，但在肿瘤细胞中高度激活，以维持无限增殖和永生表型，是几乎所有肿瘤发生与进展的特异性标志物。传统 PCR 技术虽可用于端粒酶活性检测，但难以在细胞裂解液中评估肿瘤恶性程度、进展和转移。本文设计了一种基于 FRET 的比率荧光寡核苷酸探针，用于高保真检测端粒酶活性，从而准确区分不同端粒酶表达水平的癌细胞。该探...
选择性碱基配对是 DNA 识别的基础。本文利用稳态荧光光谱、小角 X 射线散射（SAXS）、微尺度热泳（MST）和差动电泳迁移率，阐明了一种基于 Förster 共振能量转移（FRET）的两组分分子信标 DNA 生物传感器的分子与结构细节。该传感器用于检测导致慢性髓系白血病（CML）的最常见 BCR-ABL 融合序列 e14a2 和...
本文首次将液相剥离制备的黑磷纳米片（BPNSs）用作荧光猝灭材料，构建了一种用于快速检测 microRNA（miRNA）的荧光生物传感器。6-羧基荧光素（6-FAM）标记的单链 DNA 探针（pDNA）通过碱基与 BPNSs 表面磷原子间的范德华力吸附，FAM 与 BPNSs 距离接近而发生荧光共振能量转移（FRET），导致荧光猝灭...
阐明5'-AMP激活蛋白激酶（AMPK）信号在细胞内的时空动态，是连接营养感知与下游功能的关键。目前已有三种遗传编码的Förster共振能量转移（FRET）型AMPK生物传感器，可揭示AMPK信号在特定刺激下如何在细胞内传播，并与生化证据共同促进对AMPK信号的整体理解。本方案描述在活细胞中以细胞器特异性方式成像AMPK活性所需的步...
本文报道了一种用于蛋白激酶A（PKA）活性检测的新型荧光生物传感器，该传感器基于双链DNA负载铜纳米簇（dsDNA-CuNCs）和氧化石墨烯（GO）。dsDNA由两条DNA链组成：一条链与另一条互补链杂交以稳定荧光CuNCs，另一条链含有ATP适配体序列。在无ATP时，dsDNA-CuNCs上的ATP适配体通过π-π堆积作用自发吸附...
肠锌重吸收，尤其是其调控机制，尚未完全阐明，亟需合适的肠细胞模型在体外研究锌摄取动力学及肠细胞内活性锌的作用。本研究构建了稳定表达基因编码锌生物传感器 eCalwy-5 的 Caco-2 细胞克隆，并评估该克隆是否保留肠上皮细胞特征。与野生型 Caco-2 相比，Caco-2-eCalwy 仅在紧密连接蛋白 occludin 的亚细...
碱性磷酸酶（ALP）是一种重要的普遍水解酶，已被确定为多种疾病的关键指标。本文首次将荧光聚多巴胺（F-PDA）纳米颗粒拓展到基于纳米猝灭剂的生物传感体系，并发现二氧化锰（MnO2）纳米片对 F-PDA 纳米颗粒荧光的可逆猝灭效应。通过透射电子显微镜、紫外-可见光谱、傅里叶变换红外光谱和荧光寿命实验，系统证实猝灭机制为 Förster...
膜融合是生物系统中至关重要的过程，涉及高度选择性的识别机制以转运分子和离子货物。受自然膜融合机制启发，本文利用序列特异性DNA介导的脂质体融合构建仿生生物传感器，用于高选择性检测microRNA。该体系将胆固醇修饰双链DNA自插入脂质体膜，并用发夹DNA阻断粘性末端；当目标miR-29a存在时，其与发夹DNA互补序列杂交并置换发夹，...
细菌群体感应分子调控生物发光、III型分泌、铁载体产生、菌落形态、生物膜形成和金属蛋白酶产生等种群依赖反应，因此 QS 分子的检测与定量具有重要实际意义。传统革兰氏阴性菌 QS 分子检测主要依赖细菌报告系统，但易受影响细菌生长和代谢的化合物干扰，且响应高度依赖培养龄与细胞密度。为克服这些局限，作者开发了基于体外蛋白的 FRET 生物...
转移常与癌症进展、不良生存和耐药相关，早期检测转移及定位转移肿瘤位点可改善患者生存。因此，开发改进癌症转移生物标志物检测技术有助于诊断和治疗。本研究利用纳米金刚石（NDs）开发刺激响应性转移检测复合物，以基质金属蛋白酶9（MMP9）为转移生物标志物，因为MMP9高表达提示转移。该ND-MMP9生物传感器复合物由表面功能化MMP9特异...
AMP-激活蛋白激酶（AMPK）是细胞能量代谢的核心调控激酶，也是2型糖尿病等代谢疾病的潜在治疗靶点。尽管体外研究揭示了AMPK受AMP/ATP、LKB1和CaMKK2等复杂调控，其在活体细胞与器官中的异质性仍不清楚。作者将长柔性EV连接肽引入AMPK FRET传感器AMPKAR，并将YFP替换为FRET倾向更强的YPet，构建了高...
阿托品是临床常用的抗胆碱药，通过阻断乙酰胆碱对心率的抑制作用引起心动过速，但其许多心脏效应不能仅用毒蕈碱受体拮抗解释。作者利用表达 FRET 型 cAMP 生物传感器 Epac1-camps 的小鼠心室心肌细胞，证实阿托品可阻断乙酰胆碱诱导的 cAMP 下降；意外发现即使无乙酰胆碱，或在百日咳毒素灭活 G 蛋白、M2 或 M1/3 ...
准确、灵敏地监测和成像活细胞中线粒体 pH 对化学生物学和生物医学具有重要意义。本文设计了一种基于刚果红（CR）修饰双发射半导体聚合物点（Pdots）的新型比率型荧光化学探针，用于活细胞线粒体 pH 的监测与成像，其机制为竞争性荧光共振能量转移（FRET）。Pdots 由三苯基膦（TPP）修饰聚氧乙烯壬基苯基醚（CO-520）、聚(...