Journal of pharmaceutical sciences
2018
Pace SE, Joshi SB, Esfandiary R, Stadelman R 等 8 人
本研究评估了一种基于生物素化GroEL-链霉亲和素生物层干涉（GroEL-BLI）的自动化方法，用于检测多种药理学相关单克隆抗体（mAb）溶液中瞬时形成的前聚集体。利用该方法对IgG1和IgG4 mAb的聚集倾向进行排序，并对最不稳定IgG4 mAb施加高温、酸性pH及盐酸胍等应力。结果显示，GroEL-BLI主要在尺寸排阻色谱（S...
The FEBS journal
2016
Pastor A, Singh AK, Fisher MT, Chaudhuri TK
蛋白质折叠长期依赖溶液法，如溶解度、酶活、二级结构、FRET、NMR 和氢氘交换等，但快速分析常受聚集副反应影响。本文建立一种生物层干涉（BLI）分子伴侣检测系统，用于筛选变性蛋白的优良复性条件。通过监测无核苷酸高亲和 GroEL 与固定蛋白的结合，可实时反映固定蛋白随时间的折叠程度。GroEL 优先结合暴露疏水面的未折叠或部分折叠...
Protein science : a publication of the Protein Society
2014
Naik S, Kumru OS, Cullom M, Telikepalli SN 等 12 人
本文报道了一种基于分子伴侣GroEL的生物层干涉（BLI）检测方法，用于识别药理学相关蛋白的结构改变和/或聚集物种。研究首先优化了生物素化GroEL在链霉亲和素BLI传感器上的固定，并通过圆二色、ANS荧光、浊度和GFP重折叠实验证明天然与生物素化GroEL均保持稳定的结构和活性。以酸性成纤维细胞生长因子-1（FGF-1）为例，40...