Protocol for a mammalian cell-based assay for monitoring the HIV-1 protease activity.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2012 Rajakuberan C, Hilton BJ, Wolkowicz R

蛋白酶在病毒生命周期和成功感染建立中至关重要，简便监测其催化活性可显著促进新型抗病毒药物发现，并有助于阐明所研究病毒蛋白酶的作用与机制。作者实验室开发了一种在T细胞中监测HIV-1蛋白酶（PR）蛋白水解活性的检测体系，具有稳健读出。该检测利用原型转录因子Gal4，其由N端DNA结合域（DBD）和C端反式激活域（TAD）组成，并基于两...

全细胞生物传感器 HIV-1蛋白酶eGFP报告基因Gal4融合蛋白蛋白酶抑制剂筛选

An assay to monitor HIV-1 protease activity for the identification of novel inhibitors in T-cells.

PloS one 2010 Hilton BJ, Wolkowicz R

耐药HIV-1毒株的出现、现有抗HIV药物严重副作用以及有效疫苗缺乏，凸显开发新型抗病毒药物及其发现方法的需求。本文在T细胞中建立了一种监测HIV-1蛋白酶（PR）蛋白水解活性的检测系统。该系统基于诱导表达HIV-1 PR与Gal4 DNA结合域及反激活域融合蛋白；融合蛋白结合Gal4响应元件，仅在存在有效PR抑制剂（PI）时激活下...

全细胞生物传感器 HIV-1蛋白酶蛋白酶抑制剂eGFP报告基因T细胞