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High content screening biosensor assay to identify disruptors of p53-hDM2 protein-protein interactions.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2015 Hua Y, Strock CJ, Johnston PA

本章描述了用于筛选 p53–hDM2 蛋白-蛋白相互作用(PPI)破坏剂的 p53–hDM2 PPI 生物传感器(PPIB)高内容筛选(HCS)方法。作者构建了分别携带 p53–GFP 和 hDM2–RFP 融合蛋白的重组腺病毒表达载体。p53 的 N 端转录激活域包含 hDM2 结合位点,以 GFP 融合蛋白形式表达,并通过核定位...

Characterization and optimization of a novel protein-protein interaction biosensor high-content screening assay to identify disruptors of the interactions between p53 and hDM2.

Assay and drug development technologies 2010 Dudgeon DD, Shinde SN, Shun TY, Lazo JS 等 9 人

本文报道一种新型成像型定位生物传感器高内容筛选(HCS)方法,用于鉴定p53-hDM2蛋白-蛋白相互作用(PPI)破坏剂。该生物传感器由嵌合蛋白组成,包含p53和hDM2的N端PPI结构域、核定位序列(NLS)、核输出序列(NES)及荧光报告蛋白。重组腺病毒共感染U-2 OS细胞后,表达p53 N端结构域融合绿色荧光蛋白(GFP)和...