促卵泡激素（FSH）在生殖生理中起关键作用，并日益被认为参与性腺外系统。FSH 的生物活性受糖基化调控，随年龄、生殖状态和病理状态变化。尽管血清 FSH 免疫反应浓度常用于生殖障碍患者检测，但评估 FSH 生物活性的意义仍不明确。本研究旨在开发一种新型、快速、无动物检测方法，利用共表达人 FSH 受体（FSHR）和环磷酸腺苷（cAM...
G蛋白（Gα与Gβγ亚型）驱动纹状体神经元中腺苷酸环化酶5（AC5）合成环磷酸腺苷（cAMP），这对运动协调至关重要。KCTD5直接与Gβγ相互作用以限定信号事件，但其在纹状体回路中的下游影响尚不清楚。本研究构建条件性Kctd5敲除小鼠，发现纹状体KCTD5缺失导致肌张力障碍样表型、运动协调缺陷以及行为音节转换偏移。利用cAMP生物...
目的：尚无研究报道生物传感器甲状腺刺激抗体检测法（TSAb(Bio)）用于预测Graves病（GD）放射性碘治疗（RAIT）疗效。本研究评估该新型TSAb生物测定试剂盒在20例GD患者中预测RAIT疗效的实用性，其采用cAMP生物传感器。方法：以RAIT后12个月甲状腺重量<8 g和减重率>80%为疗效标准，对TRAb、TSAb(B...
甲状腺阻断免疫球蛋白（TBI）存在于10%–15%自身免疫性甲状腺疾病（AITD）患者中并影响甲状腺功能。本研究评估新型TBI生物检测法。AITD患者血清采用细胞基Thyretain®荧光素酶报告基因法和新型Turbo™ cAMP激活荧光素酶法，并与两种TSH-R结合免疫分析比较。1011例AITD患者中131例（212份样本）TB...
人趋化因子受体8（CCR8）是癌症和自身免疫病免疫治疗的潜在靶点，抗CCR8单克隆抗体可通过调节肿瘤驻留调节性T细胞抑制肿瘤生长。随着抗CCR8抗体药物研发成为热点，抗体评价方法亟需改进。本研究构建了一种新型工程化定制细胞系HEK293-cAMP-biosensor-CCR8，将CCR8与cAMP生物传感器报告系统整合于HEK293...
精氨酸加压素（AVP）是由9个氨基酸组成的环肽激素，通过血管加压素V2受体（V2R）激活Gs蛋白并升高细胞内环磷酸腺苷（cAMP）水平，从而调节肾脏水重吸收。血浆AVP是中枢性尿崩症（CDI）诊断的重要生物标志物，传统放射免疫分析（RIA）存在操作复杂、耗时长且需处理放射性同位素等缺点。本研究建立了一种基于cAMP生物传感器的血浆A...
cAMP 差异检测器原位（cADDis）是一种新型生物传感器，可连续测量活细胞中环磷酸腺苷（cAMP）水平。该传感器由环状置换荧光蛋白连接至 Epac2 铰链区构建，形成单一荧光团生物传感器，结合 cAMP 后荧光可升高或降低。传感器具有红色和绿色向上版本以及绿色向下版本，并可提供靶向不同亚细胞定位的版本。本研究采用绿色向下 cAD...
朗格汉斯胰岛是分散于胰腺中的小型三维内分泌与支持细胞集合，通过β细胞分泌胰岛素降低血糖、α细胞分泌胰高血糖素升高血糖，在血糖稳态调控中起核心作用。包括cAMP介导通路在内的细胞内信号通路对α和β细胞激素分泌的调控至关重要。然而，胰岛的三维结构给原代人胰岛细胞内信号机制研究带来实验挑战。为克服这些限制，本文描述一种整合活细胞成像与微流...
背景：腺苷酸环化酶（AC）通路对肺血管舒张至关重要，并受低氧抑制。佛手柑内酯（FSK）变构结合 AC，刺激 ATP 催化生成 cAMP。AC6 是肺动脉主要 AC 亚型，选择性再激活 AC6 可恢复低氧下 AC 活性，但需阐明其 FSK 结合位点。方法：在常氧（21% O2）、低氧（10% O2）或 S-硝基半胱氨酸（CSNO）处理...
心房肌细胞中，轴向管与肌浆网连接控制启动心房收缩的快速钙诱导钙释放。此前研究发现，连接处ryanodine受体2（RyR2）在基础状态下磷酸化持续升高，而非连接RyR2簇仅在β肾上腺素能刺激后急性磷酸化。本研究假设心房肌细胞轴向管连接区基础3′,5′-环腺苷酸（cAMP）合成持续增强。共聚焦免疫荧光显示，结合肌浆网RyR2的junc...
Graves病是由甲状腺刺激激素受体（TSHR）抗体引起的自身免疫性甲状腺疾病。FDA批准的Thyretain™ TSI生物检测法可高特异性检测血清中甲状腺刺激抗体（TSI/TSAb），但流程复杂。为简化操作并支持半定量结果，作者构建了稳定CHO-K1细胞系，共表达嵌合TSHR（TSHR-Mc4）和基于荧光素酶的均相cAMP生物传感...
3′,5′-环腺苷酸单磷酸（cAMP）是广泛存在的第二信使，在心脏功能与疾病中发挥关键作用。成年小鼠心室肌细胞（AMVMs）中存在多个功能相关的膜微域，其cAMP信号被严格区室化。至少有两类微域位于AMVM质膜：一类与富含caveolin的脂筏相关，另一类位于非脂筏肌膜，二者具有不同的cAMP动态，并受不同受体和磷酸二酯酶（PDE）...
抗癫痫钠通道阻滞剂卡马西平（carbamazepine, CBZ）长期以来被认为可减弱cAMP信号，而cAMP信号参与癫痫发生和发作。然而，上市结构衍生物奥卡西平（oxcarbazepine, OXC）、艾司奥卡西平醋酸酯（eslicarbazepine acetate, ESL）及其主要代谢物利卡西平（licarbazepine,...
黑色素皮质素-4受体（MC4R）在能量稳态、性功能、神经保护与神经发生中发挥重要作用，是中枢神经系统 G 蛋白偶联受体（GPCR）药物靶点。MC4R 具有较高组成活性，其内源性配体可表现为反向激动剂，但调控机制不清。作者假设金属离子可调节 MC4R 基础活性，采用荧光各向异性（FA）测定和新型红移荧光肽，对芽生杆状病毒（BBV）展示...
蛋白偶联受体（GPCR）是最大的细胞表面蛋白家族，其中至少 100 个孤儿 GPCR 的内源配体仍未知，可能成为多种疾病的治疗靶点。组成型活性孤儿 GPCR 可在无配体条件下激活，反向激动剂可抑制其组成型活性，但反向激动剂筛选通常比拮抗剂筛选更难，主要受限于较窄的检测窗口。本研究开发了一种适用于高通量筛选（HTS）的 GPR3 反向...
3′,5′-环腺苷酸单磷酸（cAMP）是调控参与离子稳态和心肌兴奋-收缩耦联蛋白功能的关键第二信使。近十年来，cAMP 通过作用于离散的亚细胞区室或“微区室”来传递其多种效应，这一认识日益受到重视。本迷你综述描述了如何在活心肌细胞中可视化此类局部信号，从而更好地理解心脏生理与疾病机制。文章特别聚焦于靶向生物传感器，这类传感器可用于在...
睡眠在进化上保守，研究线虫等简单无脊椎动物可在单细胞水平揭示睡眠机制。跨物种保守的睡眠调控通路涉及环磷酸腺苷（cAMP），它作为第二信使激活蛋白激酶A。线虫在环境损伤引起的细胞应激后出现应激诱导睡眠（SIS），是研究疾病相关睡眠的模型，且由简单神经回路控制，便于解析睡眠中的 cAMP 信号。作者利用红光激活的腺苷酸环化酶 IlaC2...
多巴胺与乙酰胆碱的拮抗作用在基底神经节生理中很重要，但纹状体含 D1 与 D2 两类中型多棘神经元（MSN），难以在天然环境中定量分析二者相互作用。本研究利用活体背内侧纹状体脑片中的生物传感器成像，在单个 MSN 水平监测细胞内 cAMP。结果显示，毒蕈碱激动剂 oxotremorine 选择性降低表达 D1 受体的 MSN 亚群中...
环腺苷酸（cAMP）通过作用于肌膜离子通道相关微域调控心肌兴奋-收缩偶联，但此类微域中局部实时 cAMP 动态此前尚未被直接可视化。本研究开发了一种新型 Förster 共振能量转移（FRET）生物传感器 PLM-Epac1，将高灵敏 cAMP 传感器 Epac1-camps 融合至磷脂蛋白（phospholemman, PLM）C...
血清素（5-HT）是调节扁形虫神经肌肉功能、性成熟和产卵的重要信号分子。在曼氏血吸虫中，5-HT 作用于多种 G 蛋白偶联受体（GPCR），其中 Sm.5HTRL 可偶联 cAMP 并调节虫体运动。作者将该受体与化学发光 cAMP 生物传感器 GloSensor-22F 共表达于哺乳动物细胞中，建立可药理学分析抗血吸虫候选药物的检测...