Journal of biomolecular screening
2014
Albrecht SC, Sobotta MC, Bausewein D, Aller I 等 7 人
遗传编码氧化还原生物传感器的发展使细胞与生物体内化学特异性、定量、动态且区室化的氧化还原测量成为可能。氧化还原敏感绿色荧光蛋白(roGFP)尤其受到关注,可实时监测生物氧化还原变化。最近,将 Grx(glutaredoxin)与 roGFP2 翻译融合形成 Grx1-roGFP2,成为谷胱甘肽氧化还原电位(EGSH)传感器。线粒体是...
The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience
2013
O'Donnell KC, Vargas ME, Sagasti A
线粒体参与轴突健康维持与退行性变中的多种过程,包括 ATP 和活性氧(ROS)生成、钙缓冲及蛋白酶激活。线粒体功能与运输缺陷常见于轴突退行,但特定线粒体属性变化如何关联退行尚不清楚。作者以活体幼鱼斑马鱼皮肤感觉神经元为模型,在激光轴突切断前后监测线粒体形态、运输和氧化还原态。野生型轴突损伤后局部线粒体运输停止,表达轴突保护融合蛋白 ...
Biochemical and biophysical research communications
2013
Kolossov VL, Beaudoin JN, Hanafin WP, DiLiberto SJ 等 6 人
本研究采用比率型基因编码氧化还原敏感绿色荧光蛋白与人谷胱甘肽过氧化物酶/还原酶(glutaredoxin 1, Grx1)融合探针 Grx1-roGFP2,实时监测哺乳动物细胞胞质谷胱甘肽氧化还原电位。该探针可检测由短波长激发触发的、依赖培养基的胞质氧化。当活细胞时间序列成像的采集间隔小于 30 s 时,可揭示光诱导氧化的瞬时性质。...
PloS one
2013
Pal R, Basu Thakur P, Li S, Minard C 等 5 人
活性氧(ROS)参与心血管、炎症、退行性疾病、衰老、肌营养不良和肌肉疲劳等多种病理过程。NADPH 氧化酶(Nox)是氧化还原信号中重要的 ROS 来源,但现有工具难以在活细胞中提供足够的空间分辨率和特异性。作者将氧化还原敏感绿色荧光蛋白 roGFP 与 Nox 组织蛋白 p47phox 融合,构建了可特异性评估 Nox 活性的氧化...
Molecular plant pathology
2012
Heller J, Meyer AJ, Tudzynski P
植物受病原菌侵染时会产生活性氧(ROS)防御反应,但 ROS 对丝状真菌的作用仍不清楚。本研究将比率型氧化还原敏感绿色荧光蛋白 roGFP2 引入灰葡萄孢(Botrytis cinerea),构建真菌表达系统,用于活体测量细胞氧化还原状态。在野生型菌丝中,roGFP2 对 H2O2 诱导的氧化和 DTT 诱导的还原呈可逆响应,可通过...
Cell metabolism
2011
Albrecht SC, Barata AG, Grosshans J, Teleman AA 等 5 人
谷胱甘肽氧化还原偶联(GSH/GSSG)和过氧化氢(H2O2)是氧化还原稳态与氧化还原信号的核心,但它们在生物体内的分布难以测量。本研究在果蝇中利用遗传编码氧化还原探针,建立了在发育和衰老过程中对细胞质和线粒体等定义亚细胞区室中谷胱甘肽氧化还原电位(EGSH)和 H2O2 进行定量体内映射的方法。通过一种化学策略,在标本解剖和固定过...
Sensors (Basel, Switzerland)
2010
Arias-Barreiro CR, Okazaki K, Koutsaftis A, Inayat-Hussain SH 等 8 人
本研究利用大肠杆菌组成型表达的氧化还原敏感绿色荧光蛋白 roGFP2,构建高特异性、高通量化学诱导细胞氧化细菌生物传感器(E. coli-roGFP2)。通过双波长比率法评估 roGFP2 两个关键半胱氨酸残基间二硫键形成。与传统细菌氧化应激传感器相比,该传感器仅需数分钟即可检测氧化。过氧化氢、甲萘醌、亚硒酸钠、吡硫鎓锌、三苯基锡和...
Nature methods
2008
Gutscher M, Pauleau AL, Marty L, Brach T 等 8 人
活细胞中氧化还原过程的动态分析长期受限于缺乏合适的氧化还原生物传感器。传统氧化还原敏感绿色荧光蛋白(roGFP)存在特异性不明确、对氧化还原电位变化响应缓慢等局限。本研究证明,将人 glutaredoxin-1(Grx1)与 roGFP2 融合,可促进传感器蛋白与谷胱甘肽氧化还原对之间发生特异、实时的氧化还原平衡。Grx1-roGF...